[发明专利]一种具有转基因发根的混合型茶树的高效诱导方法有效
| 申请号： | 201710793297.5 | 申请日： | 2017-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN107529551B | 公开（公告）日： | 2020-06-19 |
| 发明（设计）人： | 魏书;卡斯卡伊.阿拉卡萨米;沙马拉.鲁鲍比.费丁南 | 申请（专利权）人： | 安徽农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;A01H5/00;A01H6/00 |
| 代理公司： | 安徽汇朴律师事务所 34116 | 代理人： | 刘海涵 |
| 地址： | 230036 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种具有转基因发根的混合型茶树的高效诱导方法，属于作物遗传育种的技术领域，该方法通过针刺法，用发根农杆菌A4菌株侵染实生苗的下胚轴，获得90％的生根率，使侵染的茶树具有发达的毛发根侧根，建立了高效稳定的茶树转基因毛发根体系，本方法所获得根系为转基因、地上部枝叶非转基因的混合型茶树，不仅可以应用于茶树根系发育调控生物学的科学研究，在茶业生产中可用于抗逆瘠薄山地的高产栽培。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 具有 转基因 发根 混合 茶树 高效 诱导 方法 | ||
【主权项】：
一种具有转基因发根的混合型茶树的高效诱导方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)筛选饱满的茶树种子，消毒后种在灭菌的营养土中，26±2℃条件下发芽两个月，获得茶树幼苗，筛选健康的茶树幼苗备用；(2)将外源基因转化至发根农杆菌A4菌株中，获得重组发根农杆菌，将重组发根农杆菌接种于A4改良固体培养基中培养，获得并收集发根农杆菌菌落；(3)用针头挑取步骤(2)的发根农杆菌菌落，戳进步骤(1)的茶树幼苗的下胚轴，针头要穿过下胚轴中间部位；然后用三角玻璃棒蘸取一些步骤(2)的发根农杆菌菌落，将其涂抹在下胚轴针刺区域；获得浸染的幼苗；(4)将浸染的幼苗放入湿度箱中，开始两个星期用含有10％(体积比)的A4菌株悬浮液给幼苗浇水，后期用1％(体积比)的MS培养基和水灌溉幼苗3个月，即获得具有转基因发根的混合型茶树。
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