[发明专利]一种同时检测石蒜属植物中三种生物碱含量的方法

摘要

本发明公开一种同时检测石蒜属植物中三种生物碱含量的方法，能够对石蒜属植物中的生物碱类物质——加兰他敏、立可拉敏和石蒜碱进行快速提取并定性定量分析。本方法以液质联用技术为基础，进行梯度洗脱，以液相色谱串联二级质谱，在正离子扫描下以MRM模式进行分析，能快速提取并准确定性定量分析石蒜属植物中的上述三种生物碱类物质，大幅缩短分析时间，提高分析准确度，可在6.0min以内的程序时间内得到检测结果，三种生物碱的保留时间均在3min以内，加标回收率为97.2‑100.2％，相对标准偏差(RSD)为0.8‑4.3％，大大提高了分析速度和准确性；从而为研究石蒜属植物中三种生物碱的积累规律和合成代谢调控提供了有效且准确的分析方法。

主权项

1.一种同时检测石蒜属植物中三种生物碱含量的方法，所述三种生物碱为加兰他敏、力可拉敏和石蒜碱，包括如下步骤：/nS1、标准溶液的制备：分别以加兰他敏、力可拉敏和石蒜碱标准品为目标物，使用甲醇为溶剂，经逐级稀释制备成三种物质的标准溶液；/nS2、待测样品溶液的配制：称取待测样品石蒜属植物，冷冻干燥后研磨成粉，以醇类有机溶剂作为提取剂，进行至少两次超声提取、混匀、离心，合并上清，浓缩，再复溶，稀释至浓度0.5-500ng/ml，得待测样品溶液；/nS3、液相色谱-串联二级质谱分析检测/n利用液相色谱-串联二级质谱对标准溶液和待测样品溶液进行检测，获得相应的加兰他敏、力可拉敏和石蒜碱的峰面积数据；/n其中，色谱条件为：/n液相色谱柱：硅胶型反相色谱柱；/n柱温：40-50℃；/n进样量：5-10μL；/n流速：0.2ml/min；/n流动相：流动相A，甲酸-水溶液；流动相B，乙腈或甲醇；/n洗脱方法：梯度洗脱，洗脱时间≤6.0min，流动相A和流动相B的体积比为(40-95)：(5-60)；/n洗脱程序为：/n