[发明专利]津川钝绥螨精包的获得及在扫描电镜下观察的方法

摘要

本发明涉及津川钝绥螨精包的获得及在扫描电镜下观察的方法，其特征是先获得容易看到精包的津川钝绥螨雄螨，然后制作并在扫描电镜下观察精包的方法，包含交配中雌雄螨的获取、雌雄螨的定型、雌雄螨的分离、雄螨的储存、精包扫描电镜标本制备与观察5部分。本发明利用十分简易巧妙的方法就可以获得津川钝绥螨雄螨精包，并能实现在扫描电镜下观察精包细微外部结构的目的，精包的获得能为扫描电镜下观察精包结构提供原材料，而扫描电镜的结果又有利于对精包其它方向的研究打下基础、提供启示。

主权项

津川钝绥螨精包的获得及在扫描电镜下观察的方法，其特征是先获得产生精包的津川钝绥螨雄螨，然后对雄螨进行一系列处理制作成能在扫描电镜下直接观察精包的方法，这其中包含交配中雌雄螨的获取、雌雄螨的定型、雌雄螨的分离、雄螨的储存、精包扫描电镜标本制备与观察5部分，具体操作为：（1）交配中雌雄螨的获取：在显微镜下，从津川钝绥螨饲养种群内，挑出津川钝绥螨的卵单独饲养至成螨后进行雌雄螨配对，配对10分钟左右雌雄螨即可交配，从而获得交配中雌雄螨；（2）交配中雌雄螨的定型：在津川钝绥螨交配后0‑120分钟内，将正处在交配过程中的雌雄个体连同饲养装置一起放置于‑80℃超低温冰箱或液氮中3‑5分钟，进行雌雄螨定型；（3）定型后雌雄螨的分离：定型后将雌雄螨连同饲养装置一起取出，再在显微镜下，用细毛笔从饲养装置中将交配的雌雄螨挑入载玻片上，再利用0号昆虫针和细毛笔等工具将交配的雌雄螨轻轻分开，防止破坏精包；（4）雄螨的储存：雌雄螨成功分开后，用细毛笔尖将雄螨挑出放入70%酒精于指形管内保存；（5）精包扫描电镜标本制备与观察：包含脱水、干燥、粘台、喷金与观察5个步骤，具体为：1）脱水：对储存于指形管中的雄螨进行梯度酒精脱水，酒精的浓度分别为：80％，90％，100％，先用胶头滴管将上层酒精吸出，然后再加入下一梯度的酒精，如此循环直到100％的酒精；2）干燥：将样品置于样品台上，利用真空干燥仪进行干燥2～3小时；3）粘台：在显微镜下用细毛笔将雄螨挑入至粘台上，使其腹面朝上，用昆虫针轻轻按压腹面，以确保虫体与导电胶能够紧密接触具有良好导电性能；4）喷金：利用离子溅射仪对螨全身镀金；5）电镜观察：在扫描电镜下观察精包，精包位于雄螨的导精趾下方。