[发明专利]一种胆固醇氧化酶突变体及其制备方法与应用在审
申请号: | 201710863361.2 | 申请日: | 2017-09-22 |
公开(公告)号: | CN107746833A | 公开(公告)日: | 2018-03-02 |
发明(设计)人: | 秦慧民;路福平;毛淑红;朱张亮 | 申请(专利权)人: | 天津科技大学 |
主分类号: | C12N9/04 | 分类号: | C12N9/04;C12P33/02;C12N15/70;C12N1/21 |
代理公司: | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙)11617 | 代理人: | 郭晓迪 |
地址: | 300222 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明提供一种通过定向改造构建的酶活力提高的胆固醇氧化酶突变体、制备方法与应用,以简单脂肪杆菌(Pimelobacter simplex)TCCC11037基因组为模板克隆出胆固醇氧化酶PsCO基因,构建重组菌株,通过反向PCR和定点突变技术获得酶活力提高的胆固醇氧化酶突变体F70L。获得的胆固醇氧化酶突变体F70L比酶活为33.35U/mg,较野生型提高了163.24%,催化胆固醇生产胆甾4‑烯‑3‑酮的催化效率提高了250%。本发明提供的胆固醇氧化酶突变体的比酶活有较大幅度提高,为今后生物酶法高效催化生产甾体药物提供了理论依据与技术保障,并且也为胆固醇氧化酶在临床上用于胆固醇的检测提供新的思路。 | ||
搜索关键词: | 一种 胆固醇 氧化酶 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种胆固醇氧化酶突变体,其特征在于,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
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