[发明专利]一种防治稻瘟病的微生物农药的制备方法

摘要

一种防治稻瘟病的微生物农药的制备方法，涉及水稻病虫害的生物防治技术领域，本发明的制备方法包括制备梯度稀释液、制备NA固体培养基、芽胞杆菌分离、制备PDA培养基、制备孢子液。本发明分离得芽胞杆菌能够分泌抗菌物质来抑制病原菌生长，并诱导植物防御系统抵御病原菌入侵，供试菌株对稻瘟病菌分生抱子的萌发、芽管的延长和附着胞的形成具有显著的抑制作用，本发明的菌株活性物质对稻瘟病菌有较强的抑制作用，对稻瘟病菌菌丝生长抑制率达到80％以上。

主权项

一种防治稻瘟病的微生物农药的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：选取健康水稻叶片，剪成5cm的叶段，放入装有质量浓度75％乙醇的三角瓶中振荡洗涤2次后倒掉乙醇，加入无菌水浸泡30min后梯度稀释，得梯度稀释液；步骤二：制备NA固体培养基，采用蛋白胨10.0g、牛肉粉3.0g、氯化钠5.0g、琼脂15.0g、葡萄糖2.5g，加蒸馏水溶解，定容至1L，PH调至7±0.1，分装后121℃灭菌20min；步骤三：吸取梯度稀释液涂布于NA固体培养基上，待吹干后，在30℃的恒温培养箱中倒置培养48h，挑取单菌落，在NA固体培养基上梯度划线再次获得单菌落，将获得的单菌落保存于NA固体培养基试管斜面备用；步骤四：制备PDA培养基，将马铃薯去皮洗净，称取200g马铃薯并切成小块，加水煮沸20‑30分钟，用八层纱布过滤，加入20g琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖20克，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000毫升定容，115℃灭菌20分钟；步骤五：NA固体培养基试管斜面上挑取单菌落，划线接种于PDA培养基上，置于25℃恒温光照条件下培养6d后，用接种环挑取菌落至无菌水中，配成孢子液，所述的孢子液即为微生物农药。