[发明专利]一种中药组合物中14种化学成分含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种中药组合物中14种化学成分含量的测定方法，采用HPLC‑MS/MS法，同时测定中药组合物中14种化学成分的含量；所述中药组合物为通脉养心丸；14种化学成分包括：大黄素、党参炔苷、二苯乙烯苷、甘草酸、甘草苷、甘草素、虎杖苷、芦丁、异甘草素、芒柄花苷、毛蕊花糖苷、没食子酸、五味子醇甲、大黄酸；方法包括：建立14种化学成分的标准曲线；获得通脉养心丸中各14种化学成分的多反应离子色谱图；确定通脉养心丸中14种化学成分的含量；本发明提供的方法具有灵敏度高，可靠性强，高效快速的特点，通过测定通脉养心丸中14种化学成分的含量，可以更有效地对通脉养心丸进行质量控制，从而保证通脉养心丸临床疗效。

主权项

1.一种中药组合物中14种化学成分含量的测定方法，其特征在于，采用HPLC-MS/MS法，同时测定中药组合物中14种化学成分的含量；所述中药组合物为通脉养心丸；所述14种化学成分包括：大黄素、党参炔苷、二苯乙烯苷、甘草酸、甘草苷、甘草素、虎杖苷、芦丁、异甘草素、芒柄花苷、毛蕊花糖苷、没食子酸、五味子醇甲、大黄酸，所述方法包括：/n(1)建立14种化学成分的标准曲线/n分别精密称定对照品大黄素、党参炔苷、二苯乙烯苷、甘草酸、甘草苷、甘草素、虎杖苷、芦丁、异甘草素、芒柄花苷、毛蕊花糖苷、没食子酸、五味子醇甲、大黄酸，用体积分数为70-100％的甲醇溶解，制成具有已知浓度的各对照品储备溶液；然后分别精密吸取14种对照品储备溶液并将其混合，用体积分数为70-100％的甲醇稀释，配制成分别具有已知浓度的14种化学成分的对照品混合储备液；/n用体积分数为70-100％的甲醇将所述对照品混合储备液稀释成一系列分别具有不同已知浓度的14种化学成分的对照品混合溶液；/n在相同的预设色谱条件和质谱条件下，将V₁体积的各浓度的对照品混合溶液分别注入高效液相色谱-质谱联用仪中，获得各对照品在不同浓度下的多反应离子色谱图；/n以各对照品的色谱峰峰面积Y为纵坐标，以各对照品的浓度X为横坐标，通过线性回归运算得到各化学成分的标准曲线；/n(2)获得通脉养心丸中各14种化学成分的多反应离子色谱图/n将质量M的通脉养心丸，用体积分数30-70％的乙醇稀释并定容至体积V₂；超声处理后，取一定体积的溶液离心，并取上清液；过滤后用体积分数30-70％的乙醇稀释N倍，作为供试品溶液；其中，N≥2；/n在与以上(1)步骤中相同的预设色谱条件和质谱条件下，取体积V₁供试品溶液注入高效液相色谱-质谱联用仪中，获得通脉养心丸中各化学成分的多反应离子色谱图；/n(3)确定通脉养心丸中14种化学成分的含量/n根据通脉养心丸中各化学成分的多反应离子色谱图的峰面积，及各化学成分的标准曲线，确定通脉养心丸中各化学成分的含量；/n预设的色谱条件包括：/n色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶的固定相；流动相：A相为0.1％甲酸-水，B相为乙腈；梯度洗脱；柱温：30℃；流速：0.3mL/分钟；进样量：10μL；/n洗脱程序为：0-10min,10％-85％B；10-13min，85％-95％B；13-19min,95％-95％。/n