[发明专利]一种稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法

摘要

本发明公开了一种稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤(1)按试剂R1的组分含量，将磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、氯化钠溶于纯化水，配制R1缓冲液；将聚乙二醇6000、叠氮钠、Tween‑20溶于R1缓冲液，得试剂R1；(2)按试剂R2的组分含量，将磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、氯化钠溶于纯化水，配制R2缓冲液；将Tween‑20、聚氧乙烯聚丙乙烯共聚物、叠氮钠溶于R2缓冲液，得分散液；制备胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒；用分散液溶解胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒，超声分散，得试剂R2。本发明优点为制备得到的试剂盒具有较高的灵敏度、定量准确度和稳定性，且操作简单、快速。

主权项

一种稳定的补体C4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)按照下列组分含量配制试剂R1：试剂R1：①按照上述试剂R1的组分含量，将磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、氯化钠溶于纯化水中，搅拌均匀，待充分溶解，配制成R1缓冲液；②按照上述试剂R1的组分含量，将聚乙二醇6000、叠氮钠、Tween‑20溶于R1缓冲液中，搅拌均匀，待所有原料充分溶解，即制得试剂R1；(2)按照下列组分含量配制试剂R2：试剂R2：①按照上述试剂R2的组分含量，将磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钾、氯化钠溶于纯化水中，搅拌均匀，待充分溶解，配制成R2缓冲液；②按照上述试剂R2的组分含量，将Tween‑20、聚氧乙烯聚丙乙烯共聚物、叠氮钠溶于R2缓冲液中，搅拌均匀，即得分散液；③制备胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒：a.将胶乳颗粒用PB缓冲液稀释到浓度为1％‑5％，每毫升体积溶液中加入EDAC 1.6mg，室温反应2h，10000‑20000rpm转速下离心30‑40min，去上清，将沉淀悬浮于MES缓冲液中，超声分散；b.再于10000‑20000rpm转速下离心30‑40min，弃上清，将沉淀悬浮于PB缓冲液中，使其中的胶乳颗粒最终浓度为3.0％，超声分散；接着，边搅拌边加入等体积的含羊抗人C4特异抗体的PB稀释液，混合搅拌，室温反应2h，其中的胶乳颗粒最终浓度为1.5％；c.10000‑20000rpm转速下离心30‑40min，弃上清，沉淀悬浮MES缓冲液中，超声分散，加入BSA，4℃封闭过夜，离心去上清后，得最终所需的胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒；④用分散液来溶解得到的胶乳包被的羊抗人C4特异抗体颗粒，使其中的胶乳颗粒终浓度为0.1‑2.0％，超声分散，最终制得试剂R2。