[发明专利]自然杀伤性T细胞培养基质及自然杀伤性T细胞的扩增培养方法有效
| 申请号： | 201710931915.8 | 申请日： | 2017-10-09 |
| 公开（公告）号： | CN107488630B | 公开（公告）日： | 2018-05-29 |
| 发明（设计）人： | 倪琳;李政楠;李艳 | 申请（专利权）人： | 天津长和生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 吴开磊 |
| 地址： | 301900 天津*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明提供了一种自然杀伤性T细胞培养基质及自然杀伤性T细胞的扩增培养方法，涉及细胞培养技术领域。本发明自然杀伤性T细胞培养基质主要由无血清培养基、自体血浆和细胞因子IL‑2组成。在应用该细胞培养基质的自然杀伤性T细胞的扩增培养方法中，采用抗体联合细胞因子IL‑2诱导人源外周血单个核细胞释放危险信号，进而激活自然杀伤性T细胞。该方法可以在保证安全性的前提下，在短周期内大量高效的扩增得到高质量的自然杀伤性T细胞，有效缓解了现有自然杀伤性T细胞培养方法中采用异源动物血清或肿瘤细胞进行培养所带来的潜在安全性风险，以及现有自然杀伤性T细胞培养方法扩增倍数低，纯度不高难以大规模应用的问题。 | ||
| 搜索关键词： | 扩增培养 培养基质 细胞因子 扩增 外周血单个核细胞 无血清培养基 细胞培养基质 细胞培养技术 异源动物血清 大规模应用 危险信号 有效缓解 肿瘤细胞 自体血浆 短周期 抗体 人源 诱导 激活 释放 应用 保证 联合 | ||
【主权项】：
1.一种自然杀伤性T细胞的培养方法，其特征在于，所述方法由以下步骤组成：步骤1：使用X-VIVO 15无血清培养基重悬人源外周血单个核细胞，并将培养基中的细胞浓度调整至1.5×106 /mL，随后接种至包被有CD16抗体的细胞培养瓶中；步骤2：将自体血浆加入上述步骤1细胞培养瓶中，自体血浆在自然杀伤性T细胞培养基质中的浓度为5％，并添加细胞因子IL-2 1000IU/mL，随后进行诱导培养14天；步骤3：在诱导培养过程中前7天，每3天进行一次补液，使用补液培养基调整细胞密度为1.5×106 /mL，并补加自体血浆和细胞因子IL-2；在诱导培养过程中后7天，每3天进行一次补液，使用补液培养基调整细胞密度为1.5×106 /mL，并补加细胞因子IL-2；步骤4：在诱导培养14天时收集自然杀伤性T细胞，将收集到的自然杀伤性T细胞用PBS缓冲液清洗3次，得到自然杀伤性T细胞。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津长和生物技术有限公司，未经天津长和生物技术有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201710931915.8/，转载请声明来源钻瓜专利网。
