[发明专利]一种八角茴香离体组培快繁方法在审
申请号: | 201710943525.2 | 申请日: | 2017-10-11 |
公开(公告)号: | CN107509635A | 公开(公告)日: | 2017-12-26 |
发明(设计)人: | 陈金水 | 申请(专利权)人: | 陈金水 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 玉林市振盛专利商标代理事务所45109 | 代理人: | 陆清源 |
地址: | 537000 广西壮族自治区*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了一种八角茴香离体组培快繁方法,特征是单叶互生,革质,披针形至长椭圆形,先端急尖或渐尖,基部楔形,全缘,下面被柔毛,叶脉羽状,中脉下陷,侧脉稍凸起,叶柄粗壮。花单生于叶腋,花圆球形,淡粉红色或深红色,花柱短,基部肥厚,柱头细小。瞢荚果成星芒状排列,幼时绿色,成熟时有红棕色,星状体径约3厘米,开裂。种子扁卵形,棕色有光泽。本发明以八角茴香种子为外植体,通过愈伤组织诱导、增殖、分化、生根、炼苗移栽等过程成功获得了八角茴香离体再植株,建立八角茴香组织培养快速繁殖技术体系,为节约栽培生产中的用种量,提高其药材的产量提供一条行之有效的途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 八角茴香 离体组培快繁 方法 | ||
【主权项】:
一种八角茴香离体组培快繁方法,其特征在于包括以下步骤:(1)无菌苗的获得:选取饱满的八角茴香种子,用75%酒精消毒65s,再用0.1%升汞溶液消毒16min,最后用无菌水漂洗6次,用无菌滤纸吸干表面水分后接种到种子萌发培养基中,接种后每天光照25小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养21天后统计萌发率,萌发培养基为:1/2MS+0.06mg/LNAA+31g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(2)愈伤诱导:当无菌苗的子叶刚展开时,取无菌苗的茎尖作为外植体,用解剖刀切成0.6cm左右长度,接种于用于愈伤诱导的培养基中培养,接种后每天光照15小时,光照强度为2200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为75%的条件下培养32天后统计诱导率;愈伤诱导培养基为:MS+4.0mg/L6‑BA+0.6mg/LNAA+1.2mg/L KT+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(3)增殖培养:将步骤(2)诱导得到的愈伤组织切割成0.6cm3大小的小块并转入增殖培养基进行扩繁,接种后每天光照15小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养32天后统计增殖情况;增殖培养基为:MS+2.2mg/L6‑BA+0.6mg/L NAA+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(4)分化培养:将步骤(3)增殖得到的愈伤组织切割成0.6cm3大小的小块并转入分化培养基诱导不定芽的产生,接种后每天光照15小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养32天后统计分化情况;分化培养基为:MS+1.2mg/LKT+2.2mg/LNAA+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(5)生根培养:将步骤(4)分化得到不定芽从基部切下并接种至生根培养基中进行诱导生根,接种后每天光照15小时,光照强度为3200lx,培养温度为24℃,空气相对湿度为70%的条件下培养32天后统计生根情况;生根培养基为:1/2MS+1.2mg/LIBA+0.6mg/L NAA+1.2%活性炭+32g/L蔗糖+6.2g/L琼脂,pH为5.9;(6)炼苗移栽:生根一个月后,打开其瓶口,并灌入无菌水,以保证其水分供应,8天后取出生根苗洗净根上所带培养基,移栽到基质由泥炭土:珍珠岩:蛭石=3:2:1组成的基质中,用留有透气孔的薄膜覆盖,放置在阴凉透气的室内,16天将薄膜揭去,然后室外培养,隔天浇一次水,移栽32天后统计成活率。
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