[发明专利]一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法

摘要

本发明提供了一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法，该技术方案首先利用由小鹅瘟病毒GPV‑HB株所制备的灭活疫苗和市售的小鹅瘟病毒活疫苗共同作为小鹅瘟病毒抗原，利用番鸭细小病毒MDPV‑FJ株所制备的灭活疫苗单独作为番鸭细小病毒抗原，免疫共分三次，小鹅瘟活疫苗和自制小鹅瘟灭活苗基础免疫一次，强化免疫两次，每次间隔三周，每次每种疫苗免疫1ml/只；番鸭细小病毒病免疫次数及间隔同上，但较小鹅瘟免疫时间推迟一周，免疫剂量为1ml/只。通过以上抗原及免疫手段，能使高免蛋中两种抗体的效价均达到较高水平。利用本发明所制备的卵黄抗体可对小鹅瘟和番鸭细小病毒病实现同时防治，而且具有极高的保护率。

主权项

一种小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)取小鹅瘟病毒GPV‑HB株，制备得到小鹅瘟灭活疫苗；取番鸭细小病毒MDPV‑FJ株，制备得到番鸭细小病毒灭活疫苗；购买市售小鹅瘟活疫苗待用；2)取蛋鸡，分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的基础免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的基础免疫，两周后分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的首次强化免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的首次强化免疫，两周后分别注射所述小鹅瘟灭活疫苗和小鹅瘟活疫苗进行小鹅瘟疫苗的二次强化免疫，一周后注射所述番鸭细小病毒灭活疫苗进行番鸭细小病毒疫苗的二次强化免疫；上述注射行为的剂量均为1mL/只；3)当小鹅瘟病毒和番鸭细小病毒抗体琼扩效价均≥1:64时，收集高免蛋，浸入1％(v/v)的新洁尔灭溶液中浸泡10～15min，晾干，分离并收集卵黄，破碎得到卵黄匀浆，向其中加入4倍于卵黄匀浆体积的醋酸盐缓冲液，搅拌60min，过滤，向滤液中加入终浓度为2～4％(v/v)的辛酸，继续搅拌60min，过滤至滤液澄清，收集滤液，过滤除菌，即得到所述小鹅瘟病毒、番鸭细小病毒二联卵黄抗体。