[发明专利]基于金纳米颗粒类氧化酶特性的选择性模拟酶构建及应用有效
| 申请号： | 201710957185.9 | 申请日： | 2017-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN107807242B | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 张宇;范霖;马明;顾宁 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | G01N33/66 | 分类号： | G01N33/66;G01N33/14 |
| 代理公司： | 32204 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) | 代理人： | 柏尚春 |
| 地址： | 210096 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶构建及应用。该选择性模拟酶为全氟溴辛烷PFOB增强的通过分子印迹技术构建的基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶PFOB‑MIP，基于金纳米颗粒的类氧化酶特性，利用氨基苯硼酸实现对糖类分子的结合与亲和力提升，并进一步结合分子印迹技术构建针对底物分子的选择性壳层，同时采用全氟溴辛烷作为氧供给池，从而构建出能对糖类进行选择性识别催化并具有更强催化活性的模拟氧化酶，并将其应用于血糖及食品中糖类的检测。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 纳米 颗粒 氧化酶 特性 选择性 模拟 构建 应用 | ||
【主权项】：
1.一种基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶的构建方法，其特征在于：该选择性模拟酶为全氟溴辛烷PFOB增强的通过分子印迹技术构建的基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶PFOB-MIP，该构建方法包括以下步骤：/n1)将巯基或氨基末端磷脂溶于氯仿，80-100℃下与纯水混合，并滴入PFOB，冷却后超声分散获得巯基或氨基末端磷脂包覆的PFOB；/n2)将聚苯乙烯微球PS与牛血清白蛋白BSA混合，于中性或偏酸性体系中孵育后离心去除游离BSA；/n3)加入金纳米颗粒AuNPs，孵育后离心去除多余AuNPs；/n4)加入氨基苯硼酸APBA，以及用巯基或氨基末端的磷脂包覆的PFOB，室温静置；/n5)加入葡萄糖Glu，4-40℃震荡；/n6)加入N,N-亚甲基双丙烯酰胺，室温震荡；/n7)加入过硫酸铵水溶液和磷酸缓冲液PBS，充氮后37-80℃震荡12-24h；/n8)用PBS洗涤去除印迹分子，每次离心中间室温震荡，得到基于金纳米颗粒氧化酶特性的选择性模拟酶。/n
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