[发明专利]一种血散薯中微量生物碱单体的分离方法

摘要

本发明提供一种血散薯中微量生物碱单体的分离方法，属于中草药提取技术领域。本发明的方法所提取的生物碱单体为佐氏千金藤碱和vireakine，包括的步骤为：乙醇回流提取血散薯粉；用石油醚脱脂，用体积比为90:10‑20:80的石油醚‑乙酸乙酯混合溶液梯度洗脱，再经硅胶柱层析分离、经硅胶柱层析纯化、凝胶色谱柱纯化、TLC检测得到目标物。本发明为首次从血散薯中分离得到佐氏千金藤碱和vireakine，由于生物碱成分是血散薯的主要活性成分，这些生物碱单体的获得对于血散薯药材质量标准的把控和药物研究具有积极意义。

主权项

1.一种血散薯中微量生物碱单体的分离方法，其特征在于：生物碱单体为佐氏千金藤碱和vireakine，所述方法包括以下步骤：(1)将干燥的血散薯粉碎，利用乙醇回流提取，提取液经减压浓缩、低温冷冻干燥或喷雾干燥得到血散薯乙醇提取物；(2)将血散薯乙醇提取物分散在蒸馏水或去离子水中，用石油醚脱脂后弃油相得水相A，水相A使用乙酸乙酯萃取，浓缩萃取液得到EA部分；(3)将所述EA部分经硅胶柱层析分离，用体积比为90:10‑20:80的石油醚‑乙酸乙酯混合溶液梯度洗脱，得石油醚‑乙酸乙酯体积比40:60洗脱液；(4)将所述石油醚‑乙酸乙酯体积比40:60洗脱液浓缩至干得固体，固体再经硅胶柱层析分离，用体积比为45:55和50:50的石油醚‑乙酸乙酯梯度洗脱，收集石油醚‑乙酸乙酯体积比50:50洗脱的部分，浓缩后，再使用硅胶柱纯化，用体积比为40:60的氯仿‑丙酮洗脱并收集洗脱部分，得到化合物佐氏千金藤碱和vireakine的混合物，洗脱部分通过凝胶色谱柱Sephadex LH‑20纯化，洗脱剂为体积比50:50的二氯甲烷‑甲醇溶液，TLC检测，收集目标流出液，即得到化合物佐氏千金藤碱和vireakine；其中，佐氏千金藤碱的结构式为：Vireakine的结构式为：