[发明专利]一种外泌体微量DNA的建库方法有效
申请号: | 201710972805.6 | 申请日: | 2017-10-18 |
公开(公告)号: | CN109680343B | 公开(公告)日: | 2022-02-18 |
发明(设计)人: | 王全磊;商周春;刘龙奇;陈芳;卢森;高雅;吴亮;董国艺;邓秋婷;袁月;刘洋 | 申请(专利权)人: | 深圳华大生命科学研究院 |
主分类号: | C40B50/06 | 分类号: | C40B50/06 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 孙银行;彭家恩 |
地址: | 518083 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 一种外泌体微量DNA的建库方法,包括:将包含转座子末端序列和标签序列的DNA序列与TN5酶包埋成TN5酶复合物;将外泌体、所述TN5酶复合物和含有IGEPAL的反应缓冲液共同孵育,使所述外泌体裂解并使外泌体DNA片段化;对片段化的外泌体DNA进行纯化,然后对纯化的外泌体DNA进行扩增,得到外泌体DNA文库。本发明实现外泌体微量DNA的TN5高通量文库构建,解决现有外泌体DNA建库技术的操作复杂、周期长、通量低等问题,为基于外泌体DNA分子诊断与应用奠定技术基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 外泌体 微量 dna 方法 | ||
【主权项】:
1.一种外泌体微量DNA的建库方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)TN5酶复合物制备:将包含转座子末端序列和标签序列的DNA序列与TN5酶包埋成TN5酶复合物;(2)外泌体裂解及转座:将外泌体、所述TN5酶复合物和含有IGEPAL的反应缓冲液共同孵育,使所述外泌体裂解并使外泌体DNA片段化;(3)片段纯化及扩增:对片段化的外泌体DNA进行纯化,然后对纯化的外泌体DNA进行扩增,得到外泌体DNA文库。
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