[发明专利]一种测定黄芪多糖的单糖组成的方法

摘要

本发明公开了一种测定黄芪多糖的单糖组成的方法，其包括如下步骤1)制备黄芪多糖水解样品；2)制备混合单糖标准品；3)柱前衍生化处理分别将步骤1)所得黄芪多糖水解样品和步骤2)所得混合单糖水解标准品与0.5mol/L的PMP甲醇溶液及0.3mol/L的NaOH溶液混合，充分振摇，75℃水浴条件下反应35min，后冷却至室温，加入0.3mol/L的盐酸进行中和，再加入氯仿进行萃取，离心，弃去有机层，重复萃取2～3次，得上层水液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分别得黄芪多糖衍生化处理溶液和混合单糖衍生化处理溶液，备用；4)高效液相色谱法分析确定黄芪多糖的单糖组成及其含量。本发明灵敏度高、样品用量少、稳定性好，实现了操作简单且较低成本地检测黄芪多糖中的单糖组成。

主权项

一种测定黄芪多糖的单糖组成的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)制备黄芪多糖水解样品：取黄芪精制多糖与2mol/L的三氟乙酸溶液混合后于90℃下水浴处理10h，用4mol/L的氢氧化钠溶液中和至中性，离心去上清液得黄芪多糖水解样品，备用；2)制备混合单糖标准品：取D‑甘露糖、鼠李糖、D‑葡萄糖、D‑核糖、D‑半乳糖醛酸、D‑半乳糖和阿拉伯糖共溶于水得混合单糖标准品，备用；3)柱前衍生化处理：分别将步骤1)所得黄芪多糖水解样品和步骤2)所得混合单糖水解标准品与0.5mol/L的PMP甲醇溶液及0.3mol/L的NaOH溶液混合，充分振摇，75℃水浴条件下反应35min，后冷却至室温，加入0.3mol/L的盐酸进行中和，再加入氯仿进行萃取，离心，弃去有机层，重复萃取2～3次，得上层水液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分别得黄芪多糖衍生化处理溶液和混合单糖衍生化处理溶液，备用；4)高效液相色谱法分析：通过高效液相色谱法分别对步骤3)所得的黄芪多糖衍生化处理溶液和混合单糖衍生化处理溶液的色谱图进行对比及分析，确定黄芪多糖的单糖组成及其含量。