[发明专利]一种快速检测黄牛CRABP2基因单核苷酸多态性的方法及其专用试剂盒有效
申请号: | 201710985234.X | 申请日: | 2017-10-20 |
公开(公告)号: | CN107513579B | 公开(公告)日: | 2020-01-10 |
发明(设计)人: | 黄永震;文逸凡;郑立;张子敬;张桂民;徐嘉威;李继超;雷初朝;党瑞华;蓝贤勇;陈宏 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 61200 西安通大专利代理有限责任公司 | 代理人: | 范巍 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明公开了一种快速检测黄牛CRABP2基因单核苷酸多态性的方法及其专用试剂盒。以黄牛全基因组DNA为模板,以引物对P1和P2为引物,PCR扩增黄牛CRABP2基因;PCR产物分别经限制性内切酶Apa I和Sal I消化后,进行琼脂糖凝胶电泳;根据电泳结果鉴定黄牛CRABP2基因第2458位和3878位的单核苷酸多态性。本发明所述的方法能够检测黄牛CRABP2基因的单核苷酸多态性,在DNA水平上筛查和检测与黄牛生长性状密切的相关分子遗传标记,从而用于牛的辅助选择和分子育种,加快本地黄牛良种繁育速度。 | ||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 黄牛 crabp2 基因 核苷酸 多态性 方法 及其 专用 试剂盒 | ||
【主权项】:
1.一种检测黄牛CRABP2基因单核苷酸多态性的方法,其特征在于:包括以下步骤:/n以黄牛基因组DNA为模板,以引物对P1和P2为引物,分别扩增CRABP2基因的部分片段a和b,将片段a对应的扩增产物经限制性内切酶Apa I消化后进行琼脂糖凝胶电泳,将片段b对应的扩增产物经限制性内切酶Sal I消化后进行琼脂糖凝胶电泳,根据电泳结果鉴定黄牛CRABP2基因的单核苷酸多态性位点的基因型;/n所述黄牛CRABP2基因的单核苷酸多态性位点分别为牛CRABP2基因参考基因组序列AC_000160.1的第2458位的G或T的单核苷酸突变位点和第3878位的G或A的单核苷酸突变位点;牛CRABP2基因参考基因组序列AC_000160.1的第2458位TT和GT以及第3878位AA基因型为秦川牛体高和十字部高早期选择的分子育种基因标记;/n所述第2458位位于引物对P1扩增的区域内,引物对P1的序列为:/n上游引物F1:5’-CCAGAGGAGCCTGTGGGTTAT-3’/n下游引物R1:5’-AATCCCCTTTCCCCTTGGC-3’/n所述第3878位位于引物对P2扩增的区域内,引物对P2的序列为:/n上游引物F2:5’-GGTGGACAAAGGACCAAAAGTG-3’/n下游引物R2:5’-AGCCACCGTTGTTCTTAAATT-3’。/n
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