[发明专利]一种表征卷烟烟气对口腔收敛感影响的体外仿生模拟方法

摘要

本发明涉及一种表征卷烟烟气对口腔收敛感影响的体外仿生模拟方法，属于生物应用技术领域。该方法包括人工唾液的配制、采用仿生装置抽吸、仿生上清的制备、染色、蛋白质含量的测定等步骤。本发明的方法操作简单，利用唾液蛋白沉淀会产生收敛感的原理，采用唾液淀粉酶模拟唾液中的蛋白环境，用其沉淀比例来定量表征收敛感的大小。同时采用口腔仿生吸收装置，从而更好的模拟烟气与口腔唾液作用的过程。本方法可用于卷烟烟气对口腔收敛感的定量表征，为卷烟烟气的感官评价提供参考。

主权项

一种表征卷烟烟气对口腔收敛感影响的体外仿生模拟方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤（1），配制含1mg/mL唾液淀粉酶的人工唾液，离心，取上清，得到唾液上清；步骤（2），采用专利申请号为201520354840.8的一种用于研究主流烟气暴露于口腔中的仿生吸收装置，采用步骤（1）的唾液上清浸润模拟人工口腔黏膜内壁；选取10‑20支重量和吸阻一致的烟支作为待表征样品，平衡后进行抽吸；步骤（3），抽吸结束后，取出步骤（2）中仿生吸收装置的瓶体中的液体，离心，取上清，得到仿生上清；步骤（4），分别向步骤（1）得到的唾液上清、步骤（3）得到的仿生上清中加入考马斯亮蓝G‑250溶液，混匀，室温放置10min，得到染色唾液上清和染色仿生上清；其中，向步骤（2）得到的唾液上清中加入考马斯亮蓝G‑250溶液的体积为唾液上清体积的19倍；向步骤（3）得到的仿生上清中加入考马斯亮蓝G‑250溶液的体积为仿生上清体积的19倍；步骤（5），用分光光度计分别测定步骤（4）得到的染色唾液上清和染色仿生上清在595 nm处的吸光值，根据蛋白标准曲线，计算染色唾液上清和染色仿生上清中蛋白质含量；步骤（6），根据步骤（5）得到的染色唾液上清和染色仿生上清中蛋白质含量，计算唾液淀粉酶沉淀比例；唾液淀粉酶沉淀比例=（染色唾液上清蛋白质含量‑染色仿生上清中蛋白质含量）÷染色唾液上清蛋白质含量；该沉淀比例即为待表征样品的收敛感。