[发明专利]一种鉴别硫酸软骨素来源HPLC检测方法

摘要

本发明提供了一种快速鉴别硫酸软骨素原料的来源的HPLC法,鉴别过程不需要样品预处理、直接对样品分析,简单易行,方法稳定,结果准确,极大缩短了鉴别时间；（2）本方法能够较好地实现对鲨鱼、牛、鸡或者猪来源的硫酸软骨素溯源问题。

主权项

1.一种鉴别硫酸软骨素来源HPLC检测方法，其特征在于，该检测方法步骤为：(1)检测波长的测定取CS标准品溶液适量,以去离子水为参比溶液,用1cm光程长的比色皿扫描测定190‑1100nm的紫外可见吸收曲线，得到化合物的紫外可见光谱；(2)色谱条件色谱柱:安捷伦Zorbax SAX；流动相A为水溶液，流动相B为2mol·L^‑的氯化钠溶液，梯度洗脱；检测波长为232nm；流速为1.0ml·min^‑；柱温：40℃；(3)酶解条件根据称样量及酶活性加入过量的CS ABC酶解液200μL，CS,ABC酶解液反应温度为30‑40℃，反应时间2‑5h，在进样前先将样品液在100℃加热使其凝固，经离心除去杂质，再经0.45μm滤膜滤过，可得澄清的供试品溶液；(4) 对照品储备液及工作液的制备适量取硫酸软骨素对照品干燥，精密称取200 mg于小烧杯中，加入二乙睛，振荡使其分散均匀，再加入纯水，超声波溶解，转移至100 mL容量瓶，加水定容，制成质量浓度为2 mg/mL的储备液储于冰箱中；精密量取对照品储备液0.5,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 mL，分别置于10 mL容量瓶中，加水至刻度并摇匀，在进行高效液相色谱仪测定前用0.45μm滤膜过滤。