[发明专利]一种来源干细胞构建组织工程化骨及其制备方法在审
申请号: | 201711003504.9 | 申请日: | 2017-10-24 |
公开(公告)号: | CN109692349A | 公开(公告)日: | 2019-04-30 |
发明(设计)人: | 关茜茹 | 申请(专利权)人: | 关茜茹 |
主分类号: | A61L27/38 | 分类号: | A61L27/38;A61L27/22;A61L27/24;A61L27/20;A61L27/54 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 710000 陕西省西安市雁*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明涉及一种组织工程化骨,具体地说关于一种双基因稳定表达的组织工程化骨及其制备方法。本发明的技术方案如下:一种Ne11‑1与VEGF稳定表达的脂肪来源间充质干细胞构建组织工程化骨,它由下列方法制得:(1)质粒介导的Ne11‑1与VEGF基因协同转染体外培养的脂肪来源间充质干细胞,并对细胞传代检测其表达情况;(2)将步骤(1)得到的细胞系与载有盐酸软骨素的胶原基骨修复材料共同培养,即获得能够稳定表达Ne11‑1与VEGF基因的组织工程骨。本发明优点表现在:Ne11‑1与VEGF基因协同修饰的添加盐酸软骨素的胶原基组织工程化骨,新骨形成效果优于BMP2、Ne11‑1或VEGF单独修饰的普通组织工程骨。 | ||
搜索关键词: | 组织工程化骨 稳定表达 间充质干细胞 组织工程骨 脂肪来源 胶原基 软骨素 修饰 盐酸 制备 协同 干细胞构建 骨修复材料 体外培养 细胞传代 新骨形成 质粒介导 双基因 构建 转染 检测 表现 | ||
【主权项】:
1.一种来源干细胞构建组织工程化骨及其制备方法,它由下列方法制得:(1)构建Nell‑1与VEGF基因的真核表达质粒,通过转染体外培养扩增的大鼠ADSCs,载体工作浓度为20~150pfu/细胞,获得稳定表达Nell‑1与VEGF基因的ADSCs细胞系,Nell‑1与VEGF蛋白表达浓度在3mg/ml以上;(2)构建胶原蛋白与Ca2+的自组装体系,并在反应体系中添加终浓度为0.01%~0.1%的盐酸软骨素,获得载有盐酸软骨素的胶原基组织工程支架;(3)将(1)中的构建的细胞密度为1×107/ml~1×109/ml的稳定表达Nell‑1与VEGF基因的ACSCs细胞系与(2)中得到的体积为2~20cm3的胶原基骨修复材料共同培养,最终获得Nell‑1与VEGF协同修饰脂肪来源干细胞构建组织工程化骨。
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