[发明专利]水稻愈伤组织不对称还原p-苯丙酮类化合物的方法

摘要

本发明提供一种水稻愈伤组织不对称还原p‑苯丙酮类化合物的方法，包括：p‑苯丙酮类化合物标准品的制备、水稻组织提取、培养基的制备、水稻组织对底物的还原、水稻愈伤培养、培养液的缓冲、水稻愈伤对底物的不对称还原。本发明的原料利用常见的植物‑水稻的愈伤组织，本发明所利用的是水稻的种子和根部，其获取途经简单经济，反应试剂普及且成本低廉，反应条件简便且容易实现，对手性药物的制备及绿色化学的实现具有重大的经济和生态学意义。

主权项

1.水稻愈伤组织不对称还原p‑苯丙酮类化合物的方法，其特征是，所述方法包括以下步骤：(1)p‑苯丙酮类化合物标准品的制备：取一定量的p‑苯丙酮类化合物溶于溶剂甲醇中分多次加入还原剂KBH4以一锅法在冰水浴中进行反应，以石油醚∶乙酸乙酯＝9∶1为展开剂点板，直至反应完全后，加适量冰水除去多余的还原剂KBH4，再用稀HCl调节pH值至中性，用萃取剂无水乙醚萃取产物三次，每次20ml萃取剂，之后加入无水MgSO4干燥，过滤旋蒸浓缩后得到底物标准品；(2)水稻愈伤培养：将消毒后的水稻种子置于AA固体培养基中，放入全天候气候培养箱中培养一周后，有幼苗生成；将幼苗取出后，把叶片剪成小片放入加有生长素3mg/L的NAA的AA固体培养基，再培养两周后，有愈伤细胞生成，将其转入续代培养基中，进行再培养三周后，提取愈伤细胞，静置待用，所述续代培养基生长素含量减半；(3)培养液的缓冲：将制备好的培养液加入一定浓度的缓冲液，调节pH值为弱酸性；(4)水稻愈伤对底物的不对称还原：取2‑6g水稻叶片的愈伤细胞加入20ml缓冲后的培养液中摇床48h后加入10‑16mg底物进行反应，4天后取出，离心萃取。