[发明专利]一种快速冻存及复苏细胞的方法有效
申请号: | 201711011378.1 | 申请日: | 2017-10-25 |
公开(公告)号: | CN107751186B | 公开(公告)日: | 2021-01-22 |
发明(设计)人: | 李进军;张颖;马敏华;万金娥;王云鹏;张健;姜德玉;吴君兰;李静;尹卫东 | 申请(专利权)人: | 北京科兴生物制品有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02;C12N5/07;C12N5/09 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;陈征 |
地址: | 100085 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种快速冻存及复苏细胞的方法,包括冻存步骤和复苏步骤,所述冻存步骤包括:(1)细胞消化,制备细胞悬液;(2)稀释细胞,分装;(3)梯度降温、升温,再梯度降温至‑120℃~‑180℃,放入液氮中保存;所述复苏步骤包括:液氮中取出的冻存细胞迅速浸入38~40℃的复苏水中,快速摇动至完全融化,无需去除冻存液可直接使用细胞。本发明方法可以保障冻存细胞的批间质量一致性、细胞遗传稳定性;保证细胞复苏成活率稳定提高至98%以上,同时缩短细胞复苏及传代周期50%~60%。 | ||
搜索关键词: | 一种 速冻 复苏 细胞 方法 | ||
【主权项】:
一种快速冻存及复苏细胞的方法,其特征在于,包括冻存步骤和复苏步骤,所述冻存步骤包括:(1)细胞消化,制备细胞悬液;(2)稀释细胞,分装;(3)第一次梯度降温、升温、第二次梯度降温至‑40℃后,再迅速降温至‑120℃~‑180℃,放入液氮中保存;所述复苏步骤包括:液氮中取出的冻存细胞迅速浸入38~40℃的常规复苏用水中,快速摇动至完全融化,无需去除冻存液可直接使用细胞。
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