[发明专利]一种防止细胞癌化的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子组合物的制备方法

摘要

本发明公开一种防止细胞癌化的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子组合物的制备方法，包括以下操作步骤，S1：制备绞股蓝生物活性物质，S2：人源干细胞活性因子制备。本发明提供的制备方法，操作简单，成本低廉，适合工业化的大规模生产，工艺稳定，制得的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子组合物，相对于现有的组合物，药效更加稳定，活性更高，具有有效的防止细胞癌化的效果。

主权项

一种防止细胞癌化的绞股蓝生物活性物质与人源干细胞活性因子组合物的制备方法，其特征在于，包括以下操作步骤：S1：制备绞股蓝生物活性物质将干燥的绞股蓝和质量分数为3‑7％的可溶性大豆多糖溶液按照质量体积比为10‑13kg:3L的比例混合后，室温放置120‑140min后，将处理过的绞股蓝采用乙醇加热回流提取，制得第一次提取液和滤渣；将滤渣和质量分数为3‑7％的可溶性大豆多糖溶液按照质量体积比为10‑13kg:1L的比例混合后，采用乙醇加热回流提取，制得第二次提取液；合并两次提取液，采用减压浓缩制得稠膏状的绞股蓝提取物，经过喷雾干燥法制得绞股蓝生物活性物质；S2：人源干细胞活性因子制备剥离脐带被膜和动静脉血管后，分理处中间组织，剪成1mm×1mm×1mm的碎块，放入细胞培养液中进行培养，当细胞生长至80％汇合，收集富含干细胞生物活性因子的培养液，其中细胞培养液由以下重量份的组分制成：低糖型DMEM培养基87‑92份、异丙基‑β‑D‑硫代半乳糖苷0.01‑0.03份、抗坏血酸钠0.1‑0.5份、胎牛血清4‑6份、双抗2‑4份；采用氢氧化钠溶液将收集的富含干细胞生物活性因子的培养液的pH调至11.2‑11.4，90‑100s后，采用盐酸溶液立即将混合液的pH调至6.5‑7.0，将混合物放置在14‑18℃的环境中10‑12小时后，进行破碎、柱层析纯化制得人源干细胞活性因子；S3：组合物的制备将S1制得的绞股蓝生物活性物质和S2制得的人源干细胞活性因子按照质量比38‑48:1的质量比混合后，制得粉剂。