[发明专利]一种用于扩增甲型流感病毒的LAMP引物组及试剂盒

摘要

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种用于检测甲型流感病毒(Influenza A virus，IAV)的LAMP引物组及试剂盒。该引物组包括以下二十九组引物组中的一种或几种针对IAV的H1～H18区片段扩增的引物组和针对IAV的N1～N11区片段扩增的引物组本发明还提供了用于检测IAV病毒的试剂盒。本发明提供的引物组敏感性高、特异性强，由其制成的试剂盒能够快速、准确的检测到待测样品中含有的IAV，并且可对待测样品中的IAV型别进行分型检测及鉴定。本发明利用人造RNA作为对照检测的过程中，无假阳性及假阴性现象产生。本发明提供的引物灵敏度和特异性皆很高，所提供的可视化试剂盒将为现场检测提供极大便利，将其制备成为试剂盒可实现对IAV快速准确的检测。

主权项

一种用于扩增甲型流感病毒的LAMP引物组，其特征在于，所述LAMP引物组包括以下二十九组引物组中的一组或几组：针对IAV的H1区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H1‑F3：其核苷酸苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，H1‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；以及，H1‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，H1‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；针对IAV的H2区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H2‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，H2‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；以及，H2‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，H2‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；针对IAV的H3区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H3‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示，H3‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.10所示；以及，H3‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示，H3‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示；针对IAV的H4区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H4‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示，H4‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.14所示；以及，H4‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.15所示，H4‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示；针对IAV的H5区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H5‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.17所示，H5‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.18所示；以及，H5‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.19所示，H5‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.20所示；针对IAV的H6区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H6‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.21所示，H6‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.22所示；以及，H6‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.23所示，H6‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.24所示；针对IAV的H7区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H7‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.25所示，H7‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.26所示；以及，H7‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.27所示，H7‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.28所示；针对IAV的H8区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H8‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.29所示，H8‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.30所示；以及，H8‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.31所示，H8‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.32所示；针对IAV的H9区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H9‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.33所示，H9‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.34所示；以及，H9‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.35所示，H9‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.36所示；针对IAV的H10区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H10‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.37所示，H10‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.38所示；以及，H10‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.39所示，H10‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.40所示；针对IAV的H11区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H11‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.41所示，H11‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.42所示；以及，H11‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.43所示，H11‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.44所示；针对IAV的H12区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H12‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.45所示，H12‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.46所示；以及，H12‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.47所示，H12‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.48所示；针对IAV的H13区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H13‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.49所示，H13‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.50所示；以及，H13‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.51所示，H13‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.52所示；针对IAV的H14区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H14‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.53所示，H14‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.54所示；以及，H14‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.55所示，H14‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.56所示；针对IAV的H15区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H15‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.57所示，H15‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.58所示；以及，H15‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.59所示，H15‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.60所示；针对IAV的H16区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H16‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.61所示，H16‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.62所示；以及，H16‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.63所示，H16‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.64所示；针对IAV的H17区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H17‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.65所示，H17‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.66所示；以及，H17‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.67所示，H17‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.68所示；针对IAV的H18区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：H18‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.69所示，H18‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.70所示；以及，H18‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.71所示，H18‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.72所示；针对IAV的N1区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N1‑F3：其核苷酸苷酸序列如SEQ ID NO.73所示，N1‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.74所示；以及，N1‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.75所示，N1‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.76所示；针对IAV的N2区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N2‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.77所示，N2‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.78所示；以及，N2‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.79所示，N2‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.80所示；针对IAV的N3区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N3‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.81所示，N3‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.82所示；以及，N3‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.83所示，N3‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.84所示；针对IAV的N4区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N4‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.85所示，N4‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.86所示；以及，N4‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.87所示，N4‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.88所示；针对IAV的N5区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N5‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.89所示，N5‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.90所示；以及，N5‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.91所示，N5‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.92所示；针对IAV的N6区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N6‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.93所示，N6‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.94所示；以及，N6‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.95所示，N6‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.96所示；针对IAV的N7区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N7‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.97所示，N7‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.98所示；以及，N7‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.99所示，N7‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.100所示；针对IAV的N8区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N8‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.101所示，N8‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.102所示；以及，N8‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.103所示，N8‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.104所示；针对IAV的N9区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N9‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.105所示，N9‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.106所示；以及，N9‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.107所示，N9‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.108所示；针对IAV的N10区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N10‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.109所示，N10‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.110所示；以及，N10‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.111所示，N10‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.112所示；针对IAV的N11区片段扩增的引物组，所述引物组包括两对引物，分别为：N11‑F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.113所示，N11‑B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO.114所示；以及，N11‑FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.115所示，N11‑BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO.116所示。