[发明专利]一种肿瘤的基于核酸的靶向治疗方法

摘要

本发明公开了一种肿瘤的基于核酸的靶向治疗方法，包括如下种类：miRNA与肿瘤靶向治疗、siRNA与肿瘤靶向治疗、IncRNA与肿瘤靶向治疗和核酸适配体(Aptamer)与肿瘤靶向治疗，本发明的治疗过程无副作用，患者治疗过程较为轻松，肿瘤的靶向治疗是指利用能够与肿瘤生长、进展和扩散相关的特异性分子相互作用的药物或其他物质，通过特异性地干预这些靶点而阻止肿瘤生长和扩散。目前靶向治疗主要集中在抗肿瘤药物的研制方面，它是个体化医学的基础，其特点是利用病人的基因组、核酸和蛋白的相关信息来预防、诊断和治疗疾病，与化疗与药物治疗相比，副作用极低，从基因层次进行治疗，病人无需忍受化疗的痛苦过程，实用性更强。

主权项

1.一种肿瘤的基于核酸的靶向治疗方法，其特征在于：包括如下种类：miRNA与肿瘤靶向治疗、siRNA与肿瘤靶向治疗、lncRNA与肿瘤靶向治疗和核酸适配体(Aptamer)与肿瘤靶向治疗，利用基因工程技术将上述核酸导入人体患病部位；1）miRNA与肿瘤靶向治疗许多miRNAs参与调控细胞的生命活动，与肿瘤发生相关的miRNAs又被称为“oncomirs”，依据其主要的靶标是抑癌基因或癌基因，被分为促癌和抑癌的miRNAs，与编码蛋白基因的转录本类似，pri‑miRNAs包括有5’帽子结构以及poly(A)尾，有时候会有内含子序列，每个pri‑miRNA会由部分互补序列形成一个茎环结构，在核内核糖核酸酶的作用下，DROSHA和它的分子伴侣DGCR8一起识别茎环结构并进一步介导pri‑miRNA形成pre‑miRNA中间体，在exportin‑5 /Ran‑GTP作用下pre‑miRNA进入胞浆后，在另一个核糖核酸酶DICER1作用下形成双链miRNA分子，两条链均可产生成熟miRNAs，但也可能仅有一条链变成有功能的miRNA，而另一条链将很快降解，成熟miRNA可以与argonaute蛋白联合形成一个RNA诱导的沉默复合体(RNA‑induced silensing complex，RISC)，从而由miRNA引导该复合体到靶mRNA的3’UTR区阻断其翻译和(或)诱导其降解，肿瘤中miRNA表达的改变可以导致基因表达的显著改变，并对肿瘤的发生和发展具有重要作用； 2）siRNA与肿瘤靶向治疗RNAi治疗是指应用RNA分子在转录后水平调节基因表达，从而调控基因的表达，RNAi的序列选择的特异性以及有效抑制基因表达的能力，在真核生物体内、体外实验中均得到了证实；在肿瘤治疗方面，RNAi已被用来抑制K‑ras等基因突变诱导的肿瘤;RNAi单独治疗或者联合其他药物可以增加肿瘤对一线治疗药物的敏感性，从而有效克服化疗药物耐受这一难题;MDR1编码的p‑糖蛋白在多种药物耐药中起着重要的作用，在胰腺癌和胃癌中靶向MDR1的RNAi可敲降90% MDR1的表达，在体外可降低89%的胰腺癌细胞及58%的胃癌细胞对道诺霉素(daunorubicin)的耐药;RNAi具有可以沉默任何已知序列基因的特性，并且RNAi只靶向沉默与其100%互补配对的靶基因，已成为基因功能研究的有力手段，同时也为肿瘤的靶向治疗提供了契机；3）lncRNA与肿瘤靶向治疗长链非编码RNA(Long noncoding RNA，lncRNA)的概念是指其长度大于200nt且缺乏开放阅读框的RNA，lncRNA可以在转录、翻译和转录后水平对基因的表达进行调控;MALAT1 (metastazis‑associated lung adenocarcinoma transcript 1) 系一种LncRNA，其最先在转移相关基因分析中被发现并定义;MALAT1在大部分人类正常组织中广泛表达，包括胰腺和肺，但是在皮肤、胃、骨髓以及子宫等组织中表达缺乏，提示MALAT1可能具有组织特异性功能，MALAT1在子宫内膜间质肉瘤、宫颈癌以及肝癌中高表达，而在相对应的正常组织中表达低甚至检测不到;又如，Hox transcript antisense RNA (HOTAIR) 是从HOXC基因位点转录生成，通过反式调控方式抑制跨越40kD的HOXD基因位点的染色质的活性从而导致HOXD基因的转录抑制;HOTAIR与乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、肝癌等多种肿瘤的增殖和转移相关，HOTAIR通过与PRC2复合体相互作用促进H3K27三甲基化，从而导致多个基因的转录抑制，特别是与转移相关的基因；4）核酸适配体(Aptamer)与肿瘤靶向治疗Aptamer是碱基数为20‑80的单链核酸，既可以是DNA也可以是RNA，因为Aptamer可以与靶标特异性结合，其结合强度与结合特异性与传统抗体相当，故又称为化学抗体，目前核酸适配体己经成功应用到肿瘤标记物发现、肿瘤诊断、肿瘤成像以及肿瘤治疗中，系非常有应用前景的核酸类化合物。