[发明专利]红鱼眼组织培养快繁方法

摘要

本发明公开了一种红鱼眼组织培养快繁方法，包括外植体的选择与消毒；无菌试管苗获取；增殖培养；壮苗培养；生根培养；以及，炼苗与移栽等步骤。本发明具有培养基配方简单，培养流程简便，操作简单，繁殖系数高，种苗质量好等优点，可为红鱼眼的工业化育苗提供技术支持。

主权项

一种红鱼眼组织培养快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、外植体的选择与消毒：取红鱼眼健壮植株新萌发的嫩芽，将嫩芽依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15‑30min、添加了2‑3滴/100ml吐温‑20的0.1％升汞消毒8‑10min、无菌水冲洗3‑5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得外植体；步骤二、无菌试管苗获取：将步骤一得到的外植体置于超净工作台内，用解剖刀切成长1.0‑1.5cm的带有一个腋芽的茎段，接种到MS诱导培养基中，于培养室内培养30天得无菌试管苗，其中，MS诱导培养基为：MS+0.5‑1.5mg/L6‑BA+0.1‑0.5mg/LNAA+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；步骤三、增殖培养：将步骤二中得到的无菌试管苗接种到MS增殖培养基中，于培养室内培养30天得丛生芽，其中，MS增殖培养为：MS+0.5‑1.5mg/L6‑BA+0.1‑0.5mg/LIBA+0.1‑0.5mg/LKT+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；步骤四、壮苗培养：将步骤三中得到的丛生芽接种到MS壮苗培养基中，于培养室内培养30天得健壮植株，其中，MS壮苗培养基为：MS+0.1‑1.0mg/L2,4‑D+0.5‑1.5mg/L6‑BA+0.1‑1.0mg/LGA3+30g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；步骤五、生根培养：将步骤四中得到的健壮植株接种到MS生根培养基中，于培养室内培养30天得完整带根苗，其中，MS生根培养基为：MS+0.5‑4.0mg/LNAA+0.5‑3.0mg/L6‑BA+10g/L蔗糖+5g/L琼脂，pH值为5.8；步骤六、炼苗与移栽：将步骤五得到的完整带根苗在室温为25℃的室内打开组培瓶的瓶盖，瓶内加少量自来水，炼苗4‑7天，表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基，并立即移栽到培养基质中培养30天，得大田移栽苗，其中，培养基质主要由蛭石和泥炭土按质量比1:1配制而成。