[发明专利]一种培育具有抗药性的椰心叶甲啮小蜂种群的方法

摘要

本发明公开了一种培育具有抗药性的椰心叶甲啮小蜂种群的方法，通过直接接触法，采用固定致死百分比的杀虫剂浓度进行筛选，挑选存活的椰心叶甲啮小蜂成蜂，繁育至下一代幼蜂；并对其含有椰心叶甲啮小蜂幼蜂的椰心叶甲僵蛹进行间接接触法，采用固定致死百分比的杀虫剂浓度进行筛选，将成功羽化的成蜂继代饲养，培育15～20代以后的椰心叶甲啮小蜂种群具有高效的抗药性，害虫区域如存在多种类型的杀虫剂时，同时利用释放多种具有抗药性种群的椰心叶甲啮小蜂，用以抵御多种不同种类的杀虫剂的危害。

主权项

1.一种培育具有抗药性的椰心叶甲啮小蜂种群的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对椰心叶甲啮小蜂初始种群汰选前，确定杀虫剂剂量－死亡率线性曲线后，选取10％～50％淘汰率作为对初始种群进行抗杀虫剂汰选；(2)成蜂直接接触法：a、使用丙酮稀释杀虫剂至LC10～LC50浓度，将稀释药液倒入到玻璃容器中，每平方米需要25～130ml的药液润洗，在瓶壁上滚吸形成均匀的药膜，至丙酮完全挥发；b、引入羽化后4小时内的椰心叶甲啮小蜂成蜂，使用棉球封口后用纱布封住瓶口并用橡皮圈扎紧；c、1小时后将行为活泼，飞行敏捷的成蜂，转移到含有椰心叶甲蛹的指形管中，繁育下一代蜂种群，获得椰心叶甲僵蛹；(3)幼蜂间接接触法：a、使用丙酮稀释杀虫剂，按蒸馏水与丙酮体积比为5～9，将丙酮稀释后的杀虫剂与蒸馏水混合均匀；b、按每头椰心叶甲僵蛹需要0.2～0.8ml的药液量，将药液倒入到玻璃容器中；c、挑选寄生5～10天的含有椰心叶甲啮小蜂幼虫的椰心叶甲僵蛹，置于细纱网编织的指形漏液管中，浸入到含有药液的玻璃容器中；d、轻震指形漏液管2～4s取出，倒出椰心叶甲僵蛹，放置于卷纸上吸干药液；e、待药液完全挥发后，放回至饲养盒中待成蜂羽化；(4)每2～5代重新确立一次抗性种群的杀虫剂剂量－死亡率线性曲线，并重新获得新的致死浓度继续筛选下代抗性种群，每代的淘汰率均为10％～50％；(5)待抗性种群与初始种群的致死浓度比值大于3倍，且抗性个性频率比值大于3倍时，即获得椰心叶甲啮小蜂对该杀虫剂的相对抗性种群；步骤(1)的确定杀虫剂剂量—死亡率线性曲线，具体操作过程如下：a、将杀虫剂用丙酮配制成母液，稀释成5～6个浓度，获得稀释药液；b、将稀释药液倒入到玻璃容器中，每平方米需要25～130ml的药液，在瓶壁上滚吸形成均匀的药膜，至丙酮完全挥发后，引入羽化后4小时内椰心叶甲啮小蜂成蜂120～240头，使用棉球封口，用纱布封住瓶口并用橡皮圈扎紧；c、1小时后将所有蜂转移至无药剂处理的指形管中，放入沾有质量百分比5～20％蜜糖水棉球后用纱布封住瓶口并用橡皮圈扎紧，倒立放置于室温26～30℃下；d、使用丙酮作为对照；每处理3次重复，每重复的供试寄生蜂在120～240头，24h后检查死亡率；判断死亡试虫的标准：震动指形管，在虫体翻身后，5s内不能翻转视为死亡；对照组死亡率在10％以下为有效试验；e、确定杀虫剂剂量－死亡率线性曲线，获得椰心叶甲啮小蜂初始种群10％～50％淘汰率；每个抗药性椰心叶甲啮小蜂种群的初始种群数量不少于1万头。