[发明专利]突变基因Nasp在狼疮性模型小鼠自身免疫病发病中的作用及机制

摘要

本发明公开了突变基因Nasp在狼疮性模型小鼠自身免疫病发病中的作用及机制，用基因重组技术来表达和纯化正常的Nasp蛋白质和突变的Nasp蛋白质。然后采用表面等离子共振技术(surface plasmon resonance technology，SPR)测定纯化的Nasp蛋白质结合组蛋白H1，H3，H4和H3/H4四聚体的能力。通过比较正常Nasp蛋白质和变异Nasp蛋白质结合组蛋白的能力，可以判断变异的Nasp蛋白质结合组蛋白的能力是否发生改变。在测定蛋白质相互作用方面，SPR方法非常精确、敏感性高。我们将在体外分析突变的Nasp蛋白质结合组蛋白的能力和对细胞增殖的影响；通过新建四个同类系小鼠模型，体内研究突变基因Nasp对SLE发病的促进作用和效应机制。

主权项

突变基因Nasp在狼疮性模型小鼠自身免疫病发病中的作用及机制，其特征在于：其步骤如下：1)用基因重组技术来表达和纯化正常的Nasp蛋白质和突变的Nasp蛋白质。然后采用表面等离子共振技术(surface plasmon resonance technology，SPR)测定纯化的Nasp蛋白质结合组蛋白H1，H3，H4和H3/H4四聚体的能力。通过比较正常Nasp蛋白质和变异Nasp蛋白质结合组蛋白的能力，可以判断变异的Nasp蛋白质结合组蛋白的能力是否发生改变。在测定蛋白质相互作用方面，SPR方法非常精确、敏感性高。2)用真核细胞表达载体携带正常Nasp cDNA和基因突变的Nasp cDNA进入小鼠T细胞内并进行高表达Nasp蛋白质，然后测定细胞内DNA量的变化和溴化尿嘧啶(BrdU)掺入水平，来检测细胞增殖反应的程度。通过比较细胞内高表达的正常Nasp蛋白质和突变的Nasp蛋白质对细胞增殖影响的差异有无或程度，来检验突变的Nasp蛋白质的功能是否发生了改变。