[发明专利]一种环烯醚萜苷的提取方法

摘要

本发明提供一种环烯醚萜苷的提取方法，利用介孔硅酸钙材料辅助酸碱法提取山大颜总环烯醚萜苷，介孔碳进行纯化富集，能大大提高环烯醚萜苷的提取率和纯化率，同时保持其活性不被破坏，提高了环烯醚萜苷的安全性和完整性。本发明能有效提高环烯醚萜的提取率，降低生产成本，所得环烯醚萜苷质量高，具有很好的发展前景。

主权项

一种环烯醚萜苷的提取方法，其特征在于，由以下步骤制备而得：（1）取山大颜50~100份，粉碎成10~20目的粗粉，加水煎煮3次，煎煮液中预先加入山大颜粗粉质量20%~30%的介孔硅酸钙粉末，分别抽滤，合并滤液，浓缩含水量为20~30%，得到浓缩液Ⅰ；（2）取浓缩液Ⅰ，加入10~15倍纯化水侵泡30~60min，回流提取2~3h，过滤，滤渣加6~8倍纯化水，按浓缩液加入纤维素酶3~6mg/ml，于恒温加热磁力搅拌器中45~55℃水浴酶解2~3h，酶解后过滤，滤渣加入6~8倍量纯化水，回流提取1~1.5h，提取液用纱布过滤，滤液以3000r/min离心20~30min，将上清液浓缩，制得样品液；（3）取样品液，按照样品液：介孔碳=1g：（10~12g）于介孔碳吸附柱上样，上样后静态吸附1~2h，先用2~2.5BV蒸馏水洗脱除杂，再用体积分数15~20%的乙醇溶液洗脱，流速为1~1.2BV/h，收集洗脱液，浓缩，干燥，即可得到环烯醚萜苷粉末；所述介孔硅酸钙粉末制备方法如下：a.称取10~20份四水硝酸钙溶解到80~100份的蒸馏水中，充分搅拌1~2h使硝酸钙完全溶解，然后加入模板剂十六烷基三甲溴化铵6~10份，京尼平苷20~30份，在45~55℃下以120r/min速度搅拌1~1.5h，搅拌过程中逐渐形成白色凝胶；b.根据四水硝酸钙和九水硅酸钠中Ca：Si物质的量比为1：1称取九水硅酸钠，溶解于40~60份蒸馏水中，然后将此硅酸钠溶液缓慢滴加到硝酸钙溶液中，随着硅酸钠的加入，逐渐形成白色胶状物，反应4~5h后，在常温下陈化20~24h；然后用蒸馏水洗涤产物，再用无水乙醇进行抽提22~24h，以去除模板剂；将所得产物置于真空干燥箱中在40℃下干燥12~14h，将干燥后的产物研磨，即可得到介孔硅酸钙粉末；所述介孔碳吸附柱制备方法如下：a.称取16~22份聚丙氧基‑聚乙氧基‑聚丙氧基三嵌段共聚物和10~20份0.2mol/L盐酸溶液混合于80~100份乙醇中，40℃下搅拌1h，依次加入20~26份正硅酸四乙酯和40~50份重量百分比20%的酚醛树脂乙醇溶液，继续搅拌2~3h后将其均匀涂覆于培养皿中，室温蒸发7~9h后置于烘箱中100℃下培养24h得到淡黄色透明薄膜；b.将透明薄膜从培养皿中刮下研磨，在N2保护下，置于管式炉中800~900℃煅烧5h便得到有序介孔碳‑氧化硅复合物；c.将该复合物浸渍于10%的氢氟酸刻蚀24~26h，除去硅组分，然后分别用3~4倍量的体积分数5%氢氧化钠水溶液、1~2倍量的蒸馏水、3~4倍量的体积分数10%乙酸水溶液洗涤，最后用蒸馏水洗至中性，湿法装入色谱柱中，即得所需介孔碳吸附柱。