[发明专利]一种活性虫草酵素的制备方法

摘要

本发明提供活性虫草酵素制备的优化方法，包括：1)培养基的选择：液体培养基成分的组成如下：a、碳源100‑200重量份，b、氮源100‑200重量份，c、无机盐包括K2HPO4，MgSO4.7H2O，K2HPO4为0.4‑1.0重量份，MgSO4.7H2O为0.1‑0.7重量份，d、其他包括VB1，透明质酸和去离子水，VB1为0.02‑0.05重量份，透明质酸2.0‑5.0重量份，去离子水补到1000重量份；2)虫草菌种的移植和保藏，移植时间为3个月；3)虫草菌种的接种，接种量为3cm2；4)虫草菌种的摇床上培养，选取培养72h的处于对数生长期的虫草菌种进行扩大培养；5)虫草菌种的扩大发酵，培养10h后通气，通气量为1.8(v/v·min)。本方法制备的虫草酵素可以以重量比0.01‑10.0％添加到任意化妆品配方中使用，其中的主要营养及有效成份具有淡斑抗氧化、抗衰老、抑菌消炎等功效。

主权项

1.一种活性虫草酵素制备的优化方法，其特征在于包括如下步骤：1)液体培养基的选择液体培养基成分按照重量比，组成如下：a、碳源10-20％，b、氮源10-20％，c、无机盐包括K2HPO4、MgSO4.7H2O，K2HPO4为0.04-0.1％，MgSO4.7H2O为0.01-0.07％，d、其他包括VB1、透明质酸和去离子水，VB1为0.002-0.005％，透明质酸0.2-0.5％，去离子水补到100％；2)虫草菌种的移植和保藏移植培养的操作过程，将加了凝固剂的液体培养基pH值调到6.0左右，灭菌后倾斜放入无菌操作台得到斜面固体培养基，冷却后接种虫草菌种，接种后的试管放入恒温培养箱中，在25℃下培养7d；保藏，菌种放在4℃－6℃冰箱内避光保存，移植期为2-3个月；移植培养，将虫草菌种转接到新配制的斜面固体培养基中，重复上述操作；3)虫草菌种的接种按照步骤1)中的液体培养基成分配制1000g液体培养基，装于带侧臂管的三角烧瓶内，灭菌冷却到室温后从斜面固体培养基中取出面积为1-3cm2的块状虫草菌苔，接入液体培养基中；4)虫草菌种的摇床培养将已接入液体培养基中的虫草菌种，在24-26℃的恒温震荡培养箱中以转速为120-150r/min避光培养68-72h，期间pH控制在5.0-7.0；5)虫草菌种的扩大发酵将配制好的液体培养基倒入发酵罐，在位灭菌25-35min，降温后，迅速倒入摇床培养得到虫草菌种培养液开始扩大发酵；设置发酵温度24℃～26℃，转速120-150r/min，培养8-12h后通气，通气量1.5-1.8(v/v·min)，避光培养1～2天，期间pH控制在5.0-7.0,制得活性虫草酵素发酵液。