[发明专利]利用生物效价检测与HPLC快速检测多抗霉素B的方法

摘要

本发明涉及一种利用烟草赤星病菌作为生物效价检测的指示菌，结合HPLC化学检测方法，快速定量检测样品中多抗霉素B的含量。检测方法在于利用自制木盘作为检测工具，检测样品的数量为传统方法的9倍，每个检测玻璃木盘中对应相应的标准曲线，可快速准确的筛选生物效价高的样品，将筛选的高含量样品采用HPLC检测化学含量，降低生产成本，降低劳动强度，可用于对多抗霉素B菌种的高通量筛选和生产过程中的监控。

主权项

1.确定一种利用烟草赤星病菌快速定量分析多抗霉素B的生物效价的方法其特征在于，在如下步骤（1）确定此方法专用的自制木盘，盘为30*20*4底面镶嵌玻璃作底用34*24的玻璃做盖子；（2）确定杯碟法测定多抗霉素B的生物检测条件，下层培养基加量为150mL，上层培养基加量为125mL指示菌加量为8‑12mL，牛津杯滴加样品量为200µL；（3）标准曲线的建立：取多抗霉素B样品，用缓冲液稀释到，25IU/mL、50 IU/mL 、100 IU/mL，测不同浓度抑菌圈直径大小，并用抑菌圈直径为横坐标，多抗霉素B浓度的对数值为纵坐标，绘制标准曲线；（4）赤星病菌指示菌的制备；（5）HPLC检测方法采用C18 柱进行检测，用甲醇：水=10：90作为流动相，完成检测实验。