[发明专利]一种基于胃肠消化的大分子多肽制备原位实时监测方法

摘要

本发明公开了一种基于胃肠消化的大分子多肽制备原位实时监测方法，该技术属于蛋白质酶解过程在线监测领域。步骤为：对牛奶蛋白溶液进行酶解，在制备牛奶蛋白大分子多肽过程中，对酶解液取样经胃肠消化后再测定其降血压活性，同时收集其酶解液之前快速采集其原位实时光谱。将其光谱进行预处理，并筛选最佳光谱区间，采用联合区间偏最小二乘法建立校正模型和预测模型。并将其预测模型对酶解过程进行原位实时监测和反应终点的判断，结果显示预测模型和实测模型非常接近，可实现制备牛奶蛋白大分子酶解过程中水解度、酶解产物经胃肠消化后生物活性的有效原位检测。

主权项

1.一种牛奶大分子多肽制备原位实时监测方法，其特征在于：按照下述步骤进行：(1)对牛奶进行酶解，酶解过程中定时取样，并对所取的样品进行模拟胃肠消化，酶解过程指标为牛奶水解度及其酶解产物经过胃肠消化后的降血压活性(以ACE抑制率为指标)；所述模拟胃肠消化按以下步骤进行：取酶解产物按照2％(E/S)加酶量加入胃蛋白酶，酶解2h，酶解结束后按照4％(E/S)加酶量加入胰酶，酶解4h，反应结束后于100℃灭酶15min；(2)制备牛奶大分子降血压肽酶解过程中，定时对酶解液进行快速采集原位实时近红外光谱，采用便携式微小型近红外光谱仪采集数据，采集的光谱波长范围：900-2500nm)；(3)对光谱数据进行预处理，具体为采用多项式卷积平滑(sg)的方法对样品光谱数据进行预处理；(4)筛选最佳光谱区间，具体为采用联合区间偏最小二乘回归方法筛选牛奶水解度及其酶解产物经过胃肠消化后的降血压活性的最佳光谱区间；也可以采用偏最小二乘法、区间偏最小二乘法等方法；(5)建立校正和预测模型，具体为采用联合区间最小二乘回归方法，将牛奶水解度及其酶解产物经过胃肠消化后的降血压活性与原位实时光谱数据建立校正和预测模型，其中校正集(70个)和预测集(20个)；(6)将上述预测模型应用于制备牛奶大分子降血压肽酶解过程中，利用上述预测模型，对建模外的制备牛奶大分子降血压肽的酶解过程进行原位实时在线监测，预测酶解过程中水解度及其酶解产物经过胃肠消化后的降血压活性，并计算预测值和实测值的偏差。