[发明专利]一种多花兰的组培快繁方法

摘要

本发明提供一种多花兰的组培快繁方法，属于植物组织培养技术领域。该方法包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养等步骤。其中，外植体的消毒采用酒精消毒和植物消毒液配合消毒的方式，植物消毒液的有效成分是乙酰紫草素、芦荟汁、夹竹桃叶提取物；各个培养阶段中所使用的培养基中添加了辣木叶汁和枸杞叶汁作为营养剂。本发明的方法对外植体的伤害小，且采用本发明提供的培养基配方可显著提高多花兰的诱导分化率、外植体增殖系数及生根率，缩短培养周期，提高多花兰组培苗的质量。

主权项

一种多花兰的组培快繁方法，包括外植体的消毒、诱导培养、继代培养及壮苗培养，其特征在于具体步骤为：(1)外植体的消毒：采集多花兰的茎尖作为外植体，外植体长2cm‑4cm，首先用流水冲洗，再用体积浓度为75％的酒精浸泡1min后剥去表面部分叶片，接着在植物消毒液中浸泡8min‑15min后继续剥去部分叶片，随后在所述植物消毒液中继续浸泡5‑10min，用无菌水冲洗2‑4次，最后移入超净工作台内，在解剖镜下剥去剩下的叶片，露出生长点，用解剖刀切取2‑5mm大小的茎尖分生组织；所述植物消毒液由以下重量份的原料混合制成：乙酰紫草素0.05‑0.08份，芦荟汁5‑8份，夹竹桃叶提取物0.1‑0.2份，吐温‑602‑4份，水95‑100份；(2)诱导培养：将所述茎尖分生组织接种在诱导培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10‑14h的条件下培养48‑52天，得多花兰园球茎；所述诱导培养基的组成为：花宝1号3g/L+活性炭1g/L+赤霉素1mg/L‑2mg/L+琼脂5.0g/L‑8.0g/L+蔗糖2.0g/L‑4.0g/L+辣木叶汁5.0g/L‑8.0g/L+枸杞叶汁3.0g/L‑5.0g/L；(3)继代培养：将步骤(2)中生长得到的多花兰园球茎转接入继代培养基内，在温度为25±1℃，光照为2000LX，每天光照10‑14h的条件下培养，随着园球茎的生长不断更换培养基，继代培养75‑85天后，得到长根长叶的多花兰幼株；(4)壮苗培养：将多花兰幼株转接到壮苗培养基中，培养至根数为3‑5条，叶片3‑4片，苗高4‑8cm，即得到可以移栽的多花兰幼苗。