[发明专利]一种雪胆组培体系的建立技术

摘要

本发明公开了一种雪胆组培体系的建立技术，雪胆为葫芦科植物，干燥块根。产于云南、四川、贵州、广西等地。秋末叶黄时采挖，除去地上部分及泥沙，洗净，切片或不切片，晒干。块根呈不规则的圆块形或椭圆形，略纵乌龟状，大者直径可达20cm。外皮棕黄色或灰棕色，微粗糙，有的有凹陷的茎基痕，断面淡白色或灰褐色。质坚实，多粉质。气微，味微苦。利用植物组织培养技术提高其繁殖速度和规模,从而实现雪胆种苗的工厂化生产。本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导、增殖、生根以及炼苗移栽等步骤成功地获得了雪胆组织培养再生植株,建立了系统的雪胆组织培养植株再生体系。繁殖系数高，成苗率高，收益大。

主权项

一种雪胆组培体系的建立技术，其特征在于包括以下步骤：（1）外植体消毒：采集回来的雪胆茎段以淸水冲洗9min后并用毛刷轻轻刷去上面的杂质,在超净工作台中用70%乙醇溶液中消毒9s，后用无菌水洗3次，再用4%安替富民溶液漂洗5min，用无菌水冲洗4次后用无菌滤纸吸去水分后备用；（2）诱导培养：将步骤（1）消毒好的茎段按成对芽为一个单位切成约1.1cm长的茎段，剪去茎段底部处理过程中褐化部分，接种到诱导培养基中进行芽诱导培养,接种后先在25℃条件下全暗培养3天，然后置于每天光照9小时，光照强度为1900lx，置于培养温度为25℃的条件下培养直至形成不定芽;（3）增殖培养：将步骤（2）培养得到的芽苗，从基部切取芽并转入增殖培养基上进行继代培养，接种后先在25℃条件下全暗培养4天，然后每天光照10小时，光照强度为3100lx，培养温度为25℃的条件下培养，29天继代一次；（4）生根培养：将步骤（2）或（3）的芽苗长至1.3cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25℃条件下全暗培养5天，然后每天光照13小时，光照强度为2900lx，培养温度为25℃的条件下培养至生根；（5）炼苗移栽：将长至3cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:蛭石＝2：2混合成的基质中于每天光照9小时，光照强度为2900lx，培养温度为25℃，空气湿度为78%的培养箱中培养5天，然后移栽定植。