[发明专利]一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法有效
申请号: | 201711129996.6 | 申请日: | 2017-11-15 |
公开(公告)号: | CN107653243B | 公开(公告)日: | 2021-06-15 |
发明(设计)人: | 张艳;江帆;樊伟;刘博;李书曲;王恒超;刘聪辉;任钰为;尹丽娟 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院农业基因组研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;白艳 |
地址: | 广东省深圳市大鹏新区鹏飞路*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法。本发明提供了一种从肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA的方法,包括如下步骤:1)将动物肠道内容物或粪便经过差速离心;2)将所述微生物细胞结合使用液氮反复冻融裂解法、玻璃珠研磨法和裂解液高温裂解法进行细胞破碎,得到破碎后细胞;3)先提取所述破碎后细胞的基因组DNA,再纯化所述基因组DNA。本发明添加了微生物细胞的洗涤和富集步骤,降低了宿主和食物DNA的污染;组合多种微生物细胞裂解破碎的方法,降低宏基因组DNA的物种偏好性;增加纯化的步骤,保证DNA的纯度,可以满足构建第二代高通量测序文库的DNA要求。 | ||
搜索关键词: | 一种 肠道 内容 提取 微生物 宏基 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种从动物肠道内容物或粪便中提取微生物宏基因组DNA的方法,包括如下步骤:1)将动物肠道内容物或粪便经过差速离心,实现洗涤和富集微生物细胞;2)将所述微生物细胞结合使用液氮反复冻融裂解法、玻璃珠研磨法和裂解液高温裂解法进行细胞破碎,得到破碎后细胞;3)先提取所述破碎后细胞的基因组DNA,再纯化所述基因组DNA,实现从动物肠道内容物中提取微生物宏基因组DNA。
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