[发明专利]一种同位素原位标记土壤产甲烷古菌的方法及装置

摘要

本发明公开了一种同位素原位标记土壤产甲烷古菌的方法及装置，步骤是1）培养盆装土，加去离子水，保持淹水状态，2‑4厘米水层；2）淹水一周后，在盆养盆内移栽水稻幼苗；3）制作同位素标记装置，在水稻分蘖盛期时，开始同位素标记13C‑CO2气体；4）每天标记时间段为900‑1600，每小时标记一次，共标记7天。该装置是不锈钢方盘分别与PVC管、有机玻璃罩相连，不锈钢方盘和PVC管相连组成的底座中装有植物，有机玻璃罩顶端与小风扇相连，小白盒与小风扇相连。在有机玻璃罩上开有标记口等，硅胶管与标记口相连放置于小白盒内。对植物进行单盆同位素标记，减少了不同处理样品间的相互影响。使用方便；水封的设计更增加了密封效果。

主权项

一种同位素原位标记土壤产甲烷古菌的方法，其步骤是：A）培养盆装土，加去离子水，保持淹水状态，2－4厘米水层；称取1－2kg土壤样品，装入培养盆中，培养盆尺寸为10×16cm，土层厚度12－14cm，加去离子水，水稻栽培期间一直保持淹水状态，2－4厘米水层；B）淹水一周后，在盆养盆内移栽水稻幼苗；选取长势相同的水稻幼苗，苗龄为18－22天，移栽至培养盆中，每个盆中移栽4－6株幼苗；C）在水稻分蘖盛期时，开始标记13C‑CO2气体，13C‑CO2是通过13C‑碳酸钠溶液与硫酸反应生成；D）每天标记时间段为9:00‑16:00，每小时标记一次，共标记7天，标记时，用1.5ml注射器吸取1.2ml 13C‑碳酸钠溶液，通过罩子顶部的三通阀，注射到装有过量硫酸的塑料小白盒中，13C‑碳酸钠液体与硫酸反应，生成大约35ml的13C‑CO2，顶部的小风扇将罩子内气体混匀，每天从上午9:00到16:00的7个小时内，每个小时注射一次，连续标记7天，用同位素质谱仪检测植物，土壤以及气体中13C同位素丰度。