[发明专利]用于检测NK细胞活性的试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于检测NK细胞活性的试剂盒。目前，NK细胞活性检测方法主要有形态法、酶释法、荧光法、放免法，但这些诊断、检测方法的优点少缺点多。因此临床急需一种检测速度快且灵敏度高的检测技术，更有利于患者的及时诊治。为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种用于检测NK细胞活性的试剂盒，其能节约检测时间和检测成本，且灵敏度高。

主权项

一种用于检测NK细胞活性的方法，包括步骤：(1)取3ml肝素钠抗凝的外周血与PBS缓冲液按照1:1稀释，将稀释后的标本缓慢注入具有2ml淋巴细胞分离液的10ml离心管中，以665g转速离心20min，吸取中间白细胞层；采用PBS清洗2次，然后以393g转速离心10min，去上清液；将500μlRPMI1640培养液加入离心得到的沉淀中，混匀，得到单个核细胞PBMNC，浓度调节为1*106/ml备用；取对数期的K562‑EGFP细胞用PBS洗2次，然后以393g转速离心10min，去上清液，加500μlRPMI1640培养液混匀，放室温静置1h，浓度调节为1*105/ml备用；(2)将100μlK562‑EGFP加入对照管中；将100μlPBMNC+100μlK562‑EGFP加入检测管中；然后将对照管与检测管均放入5％CO2培养箱中孵育2h；(3)将5.520μl抗体7‑AAD‑percp‑cy5.5加入对照管与检测管中，充分混匀，静置1分钟，然后采用流式细胞仪检测细胞活性。