[发明专利]一种利用大米蛋白和阿拉伯胶构建纳米或微米尺度复合凝聚物的方法

摘要

本发明提供了一种利用大米蛋白和阿拉伯胶构建纳米或微米尺度复合凝聚物的方法，以碎米为原料，以分步提取法提纯大米蛋白，透析干燥后的大米蛋白制备成pH3.0的储备液，与相同pH值的阿拉伯胶储备液相互滴定、静置，通过调节蛋白质‑多糖比例和滴定顺序，使大米蛋白和阿拉伯胶通过静电相互作用、疏水相互作用等自组装形成不同纳米/微米尺度的复合凝聚物。该方法直接将蛋白质和多糖溶液的pH值调节至3.0，使大米蛋白分散，充分暴露其与多糖的作用位点，避免了通常的原位酸化制备复合凝聚物时大米蛋白的凝沉；其次，不同尺度的复合凝聚物可适应不同应用需求；再者，该方法简单、条件温和、安全可靠、成本低，适于大规模工业化应用。

主权项

1.一种利用大米蛋白和阿拉伯胶构建纳米或微米尺度复合凝聚物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)大米蛋白的分步提纯：将碎米磨粉后得大米粉，将大米粉用体积百分比浓度为70％的乙醇搅拌1‑2h，其中，大米粉与乙醇的料液比为1:3至1:5，所述料液比的单位为g/mL；抽滤并自然干燥20‑30h，得干燥后的物料，用蒸馏水搅拌物料提取清蛋白1‑2h，其中，物料与蒸馏水的料液比为1:5至1:10，所述料液比的单位为g/mL；于3000‑3500g条件下离心15‑30min，得A沉淀；用体积百分比浓度为5％的NaCl搅拌A沉淀提取球蛋白1‑2h，其中，所述A沉淀与NaCl的料液比为1:5至1:10，所述料液比的单位为g/mL；于3000‑3500g条件下离心15‑30min，得B沉淀；将B沉淀水洗后用0.05mol/L的NaOH搅拌提取1‑2h，其中，B沉淀与NaOH的料液比为1:5至1:10，所述料液比的单位为g/mL；于3000‑3500g条件下离心15‑30min，得上清液；用体积百分比浓度为12％的三氯乙酸调上清液pH值至4.8，于3000‑3500g条件下离心15‑30min，得C沉淀，将C沉淀用蒸馏水分散，调pH值至7.0‑7.5，用8000或14000透析袋透析后，冷冻干燥，得提纯后的大米蛋白，备存；(2)大米蛋白储备液的制备：将步骤(1)所得的大米蛋白溶于去离子水中，采用0.5‑1mol/L的盐酸调节pH值在3.0，并于40‑45℃搅拌1.5‑2h后，于3000‑3500g条件下离心20‑30min，取上清液，用Folin‑酚试剂法测定上清液中蛋白质含量，通过稀释获得质量百分比浓度分别1.0％和0.1％，且pH值3.0的两种大米蛋白溶液，储存备用；(3)阿拉伯胶储备液的制备：取阿拉伯胶溶于去离子水中，采用0.5‑1mol/L的盐酸调节pH值在3.0，并于40‑45℃搅拌1.5‑2h后，于3000‑3500g条件下离心20‑30min，取上清液，用苯酚‑硫酸法测定上清液中多糖含量，通过稀释获得质量百分比浓度分别0.5％和0.1％，且pH值3.0的两种阿拉伯胶溶液，储存备用；(4)纳米或微米尺度复合凝聚物的构建：采用步骤(2)获得的不同体积、不同浓度的大米蛋白溶液和步骤(3)获得的不同体积、不同浓度的阿拉伯胶溶液相互滴定后，得不同的反应体系，将不同的反应体系置于40‑45℃的恒温水浴搅拌反应器中立即混匀，得不同的混合体系，将不同的混合体系用分光光度计测定波长600nm处的吸光度，表征为大米蛋白和多糖相互滴定过程中混合体系的浊度变化，并用粒径测定仪测定不同的混合体系平均粒径；混合体系即为大米蛋白‑阿拉伯胶复合凝聚物溶液；(5)复合凝聚物干燥：将制备的不同大米蛋白‑阿拉伯胶复合凝聚物溶液喷雾干燥或者冷冻干燥后得到复合凝聚物颗粒。