[发明专利]脑缺血近交系长爪沙鼠的遗传生化位点标记及其应用有效
申请号: | 201711165164.X | 申请日: | 2017-11-21 |
公开(公告)号: | CN107870190B | 公开(公告)日: | 2020-02-07 |
发明(设计)人: | 王冬平;陈振文;马兰芝;尚世臣;黄斌;李桂军 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447 |
代理公司: | 11611 北京聿华联合知识产权代理有限公司 | 代理人: | 刘烽 |
地址: | 100036*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本申请涉及脑缺血型近交系长爪沙鼠的遗传生化位点标记及其应用。脑缺血型近交系长爪沙鼠(Meriones)的遗传生化位点标记,所述遗传生化位点标记选自葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶‑1、酯酶‑3、碳酸酐酶‑2、碱性磷酸酶‑1、异柠檬酸脱氢酶‑1、苹果酸酶‑1、磷酸葡萄糖转位酶‑1、肾过氧化氢酶‑2、肽酶‑3、葡萄糖磷酸异构酶‑1、血红蛋白‑β链、转铁蛋白、酯酶‑1、酯酶‑10、甘油磷酸脱氢酶‑1、β‑葡萄糖苷酸酶‑1、酯酶‑2、乳酸脱氢酶调节体‑1、血清蛋白‑1、淀粉酶‑1、酯酶‑6、酯酶‑8、酯酶‑9、酯酶‑4、过氧化氢酶‑1、酯酶‑12中的至少一种。 | ||
搜索关键词: | 缺血 近交系 长爪沙鼠 遗传 生化 标记 及其 应用 | ||
【主权项】:
1.一种脑缺血型近交系长爪沙鼠的检测方法,其特征在于,使用遗传生化位点标记来检测待测长爪沙鼠是否为脑缺血型近交系长爪沙鼠,其中,所述遗传生化位点标记选自葡萄糖-6-磷酸脱氢酶-1、酯酶-3、碳酸酐酶-2、碱性磷酸酶-1、异柠檬酸脱氢酶-1、苹果酸酶-1、磷酸葡萄糖转位酶-1、肾过氧化氢酶-2、肽酶-3、葡萄糖磷酸异构酶-1、血红蛋白-β链、转铁蛋白、酯酶-1、酯酶-10、甘油磷酸脱氢酶-1、β-葡萄糖苷酸酶-1、酯酶-2、乳酸脱氢酶调节体-1、血清蛋白-1、淀粉酶-1、酯酶-6、酯酶-8、酯酶-9、酯酶-4、过氧化氢酶-1、酯酶-12中的至少20种;所述方法包括如下步骤:/n1)根据选用的所述遗传生化位点标记确定从成年的所述待测长爪沙鼠中采集样品的种类;所述种类包括血液和脏器官,其中,所述脏器官包括肾脏、肝脏、心脏、肺脏、睾丸和胰腺;/n2)将血液离心,分离血浆、血清和血球,从而得到血浆和血清;将血球与水以体积比为1:(0.5-0.8)的比例混合,充分振荡得到溶血素;/n3)将1%的肝素与血液按1:(5-10)的体积比混合得到抗凝血;/n4)将所述脏器官与水分别以w/v为1:(0.8-1.2)的比例混合,然后匀浆并离心,制备得到所述脏器官的上清液;/n5)使用肝脏和/或肾脏的上清液来检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶-1;/n使用肾脏的上清液来检测酯酶-3;/n使用溶血素来检测碳酸酐酶-2;/n使用肾脏的上清液来检测碱性磷酸酶-1;/n使用肾脏的上清液来检测异柠檬酸脱氢酶-1;/n使用肾脏的上清液来检测苹果酸酶-1;/n使用肾脏的上清液来检测磷酸葡萄糖转位酶-1;/n使用肾脏的上清液来检测肾过氧化氢酶-2;/n使用肾脏的上清液来检测肽酶-3;/n使用溶血素来检测葡萄糖磷酸异构酶-1;/n使用溶血素来检测血红蛋白-β链;/n使用血浆来检测转铁蛋白;/n使用血浆来检测酯酶-1;/n使用肺脏样品来检测酯酶-10;/n使用肝脏和/或肾脏的上清液来检测甘油磷酸脱氢酶-1;/n使用肝脏和/或肾脏的上清液来检测β-葡萄糖苷酸酶-1;/n使用肾脏的上清液来检测酯酶-2;/n使用溶血素来检测乳酸脱氢酶调节体-1;/n使用血清来检测血清蛋白-1;/n使用肾脏和/或胰腺的上清液来检测淀粉酶-1;/n使用睾丸的上清液来检测酯酶-6;/n使用睾丸的上清液来检测酯酶-8;/n使用睾丸的上清液来检测酯酶-9;/n使用肾脏的上清液来检测酯酶-4;/n使用溶血素来检测过氧化氢酶-1;/n使用心脏的上清液来检测酯酶-12;/n6)电泳:电泳介质均为醋酸纤维素板和/或醋酸纤维素膜,电泳条件如下:/n
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