[发明专利]用于核酸等温扩增的改进方法

摘要

本发明公开了用于核酸等温扩增的改进方法，所述方法包括在预定条件下从基质释放出必要组分的步骤。此外，本发明涉及试剂盒，所述试剂盒包含嗜中温酶和包埋有用于等温扩增的必要组分的基质。本发明还公开了包含基质和嗜中温酶的组合物，和用于包埋嗜中温酶的方法。

主权项

用于非诊断目的的核酸等温扩增的方法，所述方法包括以下步骤：i)至少提供以下反应组分：a)用于在等温条件下扩增核酸的嗜中温酶；b)一个或多个用于扩增靶核酸的引物；c)dNTP和/或NTP；d)用于在等温条件下扩增核酸的酶的必要辅助因子和/或试剂；e)至少一种靶核酸；其中将反应组分a)至e)中的至少一种包埋在基质中，其中所述基质在高于至少一个引物的退火温度的温度下崩解；ii)在导致所述基质崩解的条件下孵育反应组分，以便获得反应混合物；iii)在适用于等温扩增反应的条件下孵育反应混合物；其中在步骤ii)下的孵育温度比步骤iii)的孵育温度高10℃至20℃；所述基质选自琼脂糖、低熔点琼脂糖、果胶、直链淀粉、琼脂、黄原胶、卡拉胶、羧甲基纤维素、瓜尔胶、卡如宾糖、菊粉、葡聚糖、明胶、纤维状蛋白质、聚乙烯醇和纤维素衍生物；并且所述基质形成水凝胶。