[发明专利]一种基于荧光金纳米簇的免标记荧光酶联免疫分析方法在审
| 申请号： | 201711188784.5 | 申请日： | 2017-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN109839500A | 公开（公告）日： | 2019-06-04 |
| 发明（设计）人： | 江海洋;彭涛;沈建忠;王战辉;温凯;王见一;史为民;李建成;孙淑娟 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;王春霞 |
| 地址： | 100083 *** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种基于荧光金纳米簇的免标记荧光酶联免疫分析方法。所述分析方法以蛋白包裹的荧光金纳米簇作为荧光信号探针，是酶标抗原上的葡萄糖氧化酶催化底物葡萄糖产生过氧化氢使体系中荧光金纳米簇的荧光猝灭，利用目标物和酶标抗原竞争结合在微孔板上的抗体，从而使体系的荧光发射光谱发生变化，可用于灵敏定量检测目标物分子。本发明所采用的荧光金纳米簇对葡萄糖氧化酶响应灵敏，同时免标记技术使荧光金纳米簇在本体系应用中的可控性、稳定性得到大大提高。本方法所构建的体系具有操作简便、灵敏度高、稳定性好、成本低廉等优点，可应用于灵敏定量检测动物饲料中的喹乙醇残留。 | ||
| 搜索关键词： | 纳米簇 荧光金 酶联免疫分析 葡萄糖氧化酶 标记荧光 定量检测 酶标抗原 灵敏 荧光发射光谱 目标物分子 葡萄糖产生 标记技术 催化底物 蛋白包裹 动物饲料 过氧化氢 竞争结合 响应灵敏 荧光信号 可控性 灵敏度 目标物 微孔板 喹乙醇 构建 抗体 可用 探针 荧光 猝灭 应用 残留 分析 | ||
【主权项】：
1.一种基于荧光金纳米簇的免标记荧光酶联免疫分析方法，包括如下步骤：(1)向培养板中加入包被原进行包被，再加入目标物分子的单克隆抗体进行反应，然后加入封闭液进行封闭处理；(2)分别向所述培养板中加入葡萄糖氧化酶‑目标物分子复合物和所述目标物分子的标准溶液进行反应；(3)向所述培养板中加入葡萄糖溶液进行反应；(4)向所述培养板中加入荧光金纳米簇和硫酸亚铁溶液进行反应；(5)测定所述培养板中的混合液在365nm激发波长下，650nm波长处的荧光强度变化；根据所述目标物分子的标准溶液的浓度与其荧光强度的变化值，制作标准曲线；(6)分别向所述培养板中加入所述葡萄糖氧化酶‑目标物分子复合物和待测样品的提取液进行反应；重复步骤(3)‑(5)，得到在365nm激发波长下，650nm波长处的荧光强度变化值，再根据所述标准曲线，即得到所述待测样品的提取液中所述目标物分子的浓度。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国农业大学，未经中国农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201711188784.5/，转载请声明来源钻瓜专利网。
