[发明专利]一种防止荧光淬灭的封片剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种防止荧光淬灭的封片剂的制备方法，一种防止荧光淬灭的封片剂的制备方法，包含如下步骤1）配制1mol/L Trizma Base；2）配制1mol/L NaH2PO4·2H2O；3）配制Tris‑磷酸盐缓冲液；4）配制50%甘油；5）封片剂配制。本发明制备方法简单，抗荧光淬灭的效果明显优于市面所售相关产品，样本在4℃保存两个月以内，荧光强度仍可维持在初始水平。该封片剂可用于自身发荧光的样本，也可用于经荧光染料染色后的样本的封片。该封片剂对所有荧光染料都有很好的相容性，包括FITC，Texas Red，AMCA，cy3，cy5，Alexa Fluor 488/549等。该封片剂不仅可以用于荧光显微镜的观察，也可用于激光共聚焦显微镜的观察。该封片剂可用于冰冻切片、石蜡切片、细胞爬片和血液涂片等样本的封片。

主权项

一种防止荧光淬灭的封片剂的制备方法，其特征是，包含如下步骤：1）. 配制1mol/L Trizma Base：取12.11g Trizma Base溶于100ml去离子水，备用；2）. 配制1mol/L NaH2PO4·2H2O：取15.62g NaH2PO4·2H2O溶于100ml去离子水，备用；3）. 配制Tris‑磷酸盐缓冲液：取1mol/L Trizma Base 50ml，用1mol/L NaH2PO4·2H2O调节pH至7.6，备用；4）. 配制50%甘油：取甘油100ml，加入100ml去离子水，充分混匀，高压灭菌，备用；5）. 封片剂配制：a. 取上述步骤1）配制好的Tris‑磷酸盐缓冲液5ml和75ml去离子水充分混合；b. 往步骤a制备的混合溶液中加入20g聚乙烯醇，充分搅拌混合，用保鲜膜密封，放置60℃水浴过夜；c. 取三氯叔丁醇100mg与步骤4）制备的50%甘油30ml充分搅拌混合；d. 将步骤c制备的溶液缓慢加入到步骤b制备的溶液中，一边加一边混匀；e. 混合后的液体用保鲜膜密封，并用锡箔纸包裹避光，4℃保存，即成。