[发明专利]一种烟草用复合溶钾菌剂及其制备方法和应用

摘要

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种烟草专用复合溶钾菌剂及其制备方法和应用。一种烟草专用复合溶钾菌剂，由溶钾菌TK35与溶钾菌TK55发酵后混合制成，所述溶钾菌TK35的分类命名为产氮假单胞菌(Pseudomonas azotoformans)，2015年3月11日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2015098，所述溶钾菌TK55的分类命名为假单胞菌(Pseudomonas)，2017年10月30日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2017638。本发明的有益效果是：本发明的复合溶钾菌剂可与烟草凝集素发生凝集反应，烟草凝集素介导TK35和TK55菌株在烟草根部定植，促使菌株稳定发挥对烟草生长的促进作用。

主权项

1.一种烟草用复合溶钾菌剂，其特征在于，包括溶钾菌TK35与溶钾菌TK55，所述溶钾菌TK35的分类命名为产氮假单胞菌(Pseudomonas azotoformans)，2015年3月11日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2015098，所述溶钾菌TK55的分类命名为假单胞菌(Pseudomonas)，2017年10月30日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2017638；所述复合溶钾菌剂为液态复合溶钾菌剂或者固态复合溶钾菌剂；所述液态复合溶钾菌剂的制备方法包括如下步骤，S1、菌种活化，将溶钾菌TK35和溶钾菌TK55分别接入到LB斜面培养基，25‑30℃培养18‑30h以活化菌种；S2、摇瓶培养，用生理盐水分别洗涤溶钾菌TK35、溶钾菌TK55的斜面菌种，将洗涤活化后的菌株接入装有LB培养基的摇瓶中，每个摇瓶装液量为80‑120mL，在温度为25‑30℃，摇床转速为120‑200r/min条件下，震荡培养24‑48h，得到溶钾菌TK35培养物和溶钾菌TK55培养物；上述每个摇瓶中，控制活菌数在1×10⁸‑9×10⁸CFU/mL范围内；S3、发酵罐培养，将S2中得到的溶钾菌TK35培养物以2‑10％接种量接入发酵罐A中，将S2中得到的溶钾菌TK55培养物以2‑10％接种量接入发酵罐B中，所述发酵罐A、B中均为LB培养基，起始pH均为7.2，所述发酵罐A、B在温度为25‑30℃、转速为120‑160r/min、通气量为50‑120L/h条件下发酵培养；S4、混合，将经S3中发酵罐培养后的溶钾菌TK35和溶钾菌TK55的菌液按体积比1‑2:1‑2混合，制成所述液态复合溶钾菌剂；所述固态复合溶钾菌剂的制备方法包括如下步骤，在所述液态复合溶钾菌剂中，按照每毫升液态复合溶钾菌剂中加入0.5‑1g灭菌泥炭、混合均匀后再发酵1‑3h，放置于室内晾干即制得所述固态复合溶钾菌剂。