[发明专利]一种利用猪原代肝细胞和hNTCP重组慢病毒建立乙肝病毒感染细胞模型的方法有效
申请号: | 201711220061.9 | 申请日: | 2017-11-29 |
公开(公告)号: | CN107988260B | 公开(公告)日: | 2021-02-09 |
发明(设计)人: | 周明 | 申请(专利权)人: | 立沃生物科技(深圳)有限公司 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867;C12N5/071 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 杨立;付倩 |
地址: | 518129 广东省深圳市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用猪原代肝细胞和hNTCP重组慢病毒建立乙肝病毒感染细胞模型的方法,属于细胞改造技术领域。其包括如下步骤:步骤1:制备hNTCP重组慢病毒浓缩液;步骤2:制备消化完全的肝组织;步骤3:制备猪原代肝细胞;步骤4:制备猪原代肝细胞单细胞悬液;步骤5:制备铺板用细胞悬液;步骤6:细胞铺板与培养;步骤7:对猪原代肝细胞进行hNTCP重组慢病毒感染;步骤8:建立乙肝病毒感染细胞模型。本发明在体外构建含hNTCP基因的重组慢病毒,通过高感染效率的慢病毒将hNTCP基因整合到猪原代肝细胞基因组中,实现hNTCP稳定过表达,使猪原代肝细胞支持乙肝感染。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 猪原代 肝细胞 hntcp 重组 病毒 建立 乙肝 病毒感染 细胞 模型 方法 | ||
【主权项】:
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