[发明专利]一种三七的组织培养方法

摘要

本发明属于植物组织培养技术领域，具体公开了一种三七的组织培养方法。本发明三七的组织培养方法包括以下步骤：(1)三七外植体的选取与预处理：剪取的叶片作为外植体，并用多菌灵溶液浸泡；(2)灭菌：用酒精浸泡后，再用氯化汞溶液浸泡；(3)外植体诱导培养：将上述灭菌后的外植体接种于初代培养基中进行暗培养，得愈伤组织；(4)增殖培养：将上述得到的愈伤组织接种于增殖培养基中进行培养；(5)分化培养：将上述经过增殖培养获得的愈伤组织接种于分化培养基中进行培养，即可得到分化的组培苗。用本发明的组织培养方法来对三七植株的外植体进行培养，愈伤组织的诱导率高、愈伤组织生长状态好，同时，愈伤组织的分化效果好并能实现生根。

主权项

1.一种三七的组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)三七外植体的选取与预处理：选取新鲜嫩绿、健康的三七植株，剪取三七植株的叶片作为外植体，并置于烧杯中；使用干净的软毛刷在水中轻刷上述剪取的叶片的表面后，采用质量分数为0.1％的多菌灵溶液浸泡10‑20min；倒出多菌灵溶液并用纱布包住烧杯口后，用流水冲洗10‑30min；(2)灭菌：采用体积分数为75％的酒精浸泡上述经过预处理的外植体20‑40s后，用无菌水冲洗3次，再用质量分数为0.1％的氯化汞溶液浸泡7～10min，最后再用无菌水冲洗5次；(3)外植体诱导培养：将上述灭菌后的外植体接种于初代培养基中进行暗培养，得愈伤组织；所述初代培养基组成为：在MS培养基中添加1.8‑2.3mg/L的2,4‑D、0.8‑1.3mg/L的KT、0.9‑1.2mg/L的6‑BA和0.3‑0.6mg/L NAA；(4)增殖培养：将上述得到的愈伤组织接种于增殖培养基中进行培养；所述增殖培养基组成为：在MS培养基中添加0.25‑1.0mg/L的6‑BA和0.1‑0.5mg/L的NAA；(5)分化培养：将上述经过增殖培养获得的愈伤组织接种于分化培养基中进行培养，即可得到分化的组培苗；所述分化培养基组成为：在B₅培养基中添加0.6‑1.1mg/L的6‑BA和0.08‑0.2mg/L的NAA。