[发明专利]一种黑皮鸡枞菌母种的快速扩繁方法

摘要

一种黑皮鸡枞菌母种的快速扩繁方法，包括以下步骤步骤1）制备无菌水和试管斜面；步骤2）制备母种菌丝悬液，选用组织分离培养的优质健壮的母种，在无菌条件下，在被扩母种试管内注入无菌水，用接种针拌碎生长有被扩母种的培养基，制成母种菌丝悬液；步骤3）扩接，在无菌条件下，抽取母种菌丝悬液5mL，在每一支步骤1）制备的盛有改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基的扩接试管内母种菌丝悬液摆平；步骤4）培养，将扩接试管放入恒温培养箱内恒温培养至菌丝长满试管斜面培养基。本发明操作方法简易，接种速度快，5mL菌丝悬液可扩接100支母种，用时10‑15 min，可大幅度缩短黑皮鸡纵菌母种扩繁时的发菌时间。

主权项

一种黑皮鸡枞菌母种的快速扩繁方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1）：制备无菌水和试管斜面；步骤1.1）：在三角瓶中加入水，瓶口用牛皮纸扎口；步骤1.2）：培养基采用改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基，其组分包括马铃薯150g、可溶性酒精糟100‑150g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾2g、硫酸镁0.5g、琼脂20g、酵母浸膏2‑3g、VB1 5‑10mg、适量水；步骤1.3）：将盛有水的三角瓶和盛有改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基的试管进行灭菌，灭菌后5min内将改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基摆成顶端距试管口30‑50mm的斜面，摆成的斜面培养基长度130mm，将无菌水和改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基冷却后备用；步骤2）：制备母种菌丝悬液；选用组织分离培养的优质健壮的母种，在无菌条件下，用无菌移液管或注射器在被扩母种试管内注入无菌水，用接种针拌碎生长有被扩母种的培养基，制成母种菌丝悬液；步骤3）：扩接；在无菌条件下，用无菌移液管或注射器抽取母种菌丝悬液5mL，在每一支步骤1）制备的盛有改良马铃薯葡萄糖琼脂培养基的扩接试管内注入0.05mL母种菌丝悬液摆平；步骤4）：培养；将扩接试管放入恒温培养箱内恒温培养，培养温度稳定在22‑28℃，培养6‑8天菌丝即可长满 130mm 的试管斜面培养基。