[发明专利]一种降血糖龙眼肉多糖的分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种降血糖龙眼肉多糖的分离纯化方法，包括以下步骤：(1)搅拌粉碎；(2)龙眼肉总提取物的制备；(3)萃取；(5)龙眼肉多糖的分离纯化：采用超滤系统装置，将500mL龙眼肉粗多糖溶液分别过分子质量Mr为30kD、10kD、3kD和650D的滤膜，分别得到Mr30kD、10kDMr30kD、3kDMr10kD、650DMr3kD和Mr650D的5种龙眼肉多糖溶液，其中10kDMr30kD的多糖为降血糖龙眼肉多糖。本发明能够高效分离提纯降血糖龙眼肉多糖，并且能够制备不同分子量的龙眼肉多糖，为拓展龙眼肉多糖的进一步发展提供研究基础。

主权项

一种降血糖龙眼肉多糖的分离纯化方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)搅拌粉碎：采集新鲜的龙眼肉，放入搅拌机中，以3000～5000r/min的速度搅拌15～20min，得到龙眼肉浆液，备用；(2)龙眼肉总提取物的制备：在70～74℃下，用质量分数为70％的乙醇溶液提取龙眼肉浆液3～5h，所用的料液比为1：20，收集提取液，在50℃进行减压浓缩，即得龙眼肉总提取物；(3)萃取：包括石油醚萃取、乙酸乙酯萃取和正丁醇萃取；石油醚萃取：将200mL龙眼肉总提取物转入1000mL分液漏斗中，加入400mL石油醚，振摇，静置，待溶液完全分层后，上层溶液即为石油醚萃取物；乙酸乙酯萃取：将上述石油醚萃取后剩余的龙眼肉总提取物转入1000mL分液漏斗中，加入400mL乙酸乙酯，振摇，静置，待溶液完全分层后，上层溶液即为乙酸乙酯萃取物；正丁醇萃取：将上述乙酸乙酯萃取后剩余的龙眼肉总提取物转入1000mL分液漏斗中，加入400mL正丁醇，振摇，静置，待溶液完全分层后，上层溶液即为正丁醇萃取物，剩余的下层为水萃取物；(4)龙眼肉粗多糖的提取：将上述水萃取物加入3倍于水萃取物体积的质量分数为95％的乙醇溶液，搅拌后进行第一次沉降，静置12h，离心去除上清液，得到第一沉淀物，在第一沉淀物中加入沸腾的去离子水进行溶解，再进行过滤并去除不溶物，在上清液中加入3倍体积质量分数为95％的乙醇溶液进行第二次沉降，离心并去除上清液，得到第二沉淀物，在第二沉淀物中加入去离子水，加热溶解，过滤去除不溶物，所得溶液即为龙眼肉粗多糖溶液；(5)龙眼肉多糖的分离纯化：采用超滤系统装置，将500mL龙眼肉粗多糖溶液分别过分子质量Mr为30kD、10kD、3kD和650D的滤膜，分别得到5份分子质量不同的龙眼肉多糖溶液，分别为Mr>30kD的多糖溶液50mL、10kD<Mr<30kD的多糖溶液120mL、3kD<Mr<10kD的多糖溶液150mL、650D<Mr<3kD的多糖溶液80mL和Mr<650D的多糖溶液100mL；所述的10kD<Mr<30kD的多糖为降血糖龙眼肉多糖。