[发明专利]一种基于混合生物样本的酰基肉碱大规模定性方法

摘要

本发明公开了一种基于混合生物样本的酰基肉碱大规模定性方法。针对不同类型的生物样本(血，尿，组织)，采用乙腈/水作为提取剂，涡旋(血，尿)/珠打研磨(组织)作为提取方法，离心取上清液进行真空冷冻干燥后，用乙腈/水复溶并混合，采用超高效液相色谱‑组合型四极杆离子阱质谱联用仪进行分析。基于标样得到的特征子离子和中性丢失，筛选出母离子，进行平行反应监测模式检测。本发明方法检测样本得到的代谢物种类丰富，大大增加了一次分析可定性出的酰基肉碱数目。本发明方法具有前处理简单，定性可靠，酰基肉碱结构信息获取充分等优点。

主权项

1.一种基于混合生物样本的酰基肉碱大规模定性方法，其特征在于：(1)分别将血样、尿样采用乙腈作为提取剂，以涡旋方式提取；组织样采用乙腈/水作为提取剂，以珠打研磨方式提取；分别离心取上清液进行真空冷冻干燥，得冻干样本；(2)血、尿、组织冻干样本分别用乙腈/水复溶，混合；(3)采用超高效液相色谱‑组合型四极杆离子阱质谱联用仪分层采集信息，即第一步数据依赖监测模式采集二级质谱信息，筛选对应的酰基肉碱母离子；第二步扩展酰基肉碱母离子种类后，用平行反应监测模式采集二级质谱信息，确认酰基肉碱结构；(4)根据二级质谱信息，实际色谱保留时间和预测油水分配系数ClogP的对应关系，对生物样本中的酰基肉碱进行检测和结构鉴定；(5)预测样品中未检测到的酰基肉碱的保留时间，进一步扩展酰基肉碱种类。