[发明专利]一种利用高速逆流色谱法从细柱五加叶中分离制备三萜化合物的方法

摘要

本发明公开了一种利用高速逆流色谱法从细柱五加叶中分离制备高纯度三萜化合物的方法。该方法用溶剂提取细柱五加叶得到细柱五加叶提取物浸膏，用低极性溶剂萃取除去色素后用脂肪酸酯萃取得到三萜粗提物；三萜粗提物再以体积比1‑2∶1.5‑2.5∶0.8‑2.5∶0.5‑2的正己烷：脂肪酸酯：脂肪醇：水作为两相溶剂体系在高速逆流色谱仪上进行分离，得到五个三萜化合物3‑O‑β‑D‑glucopyranosyl‑3α，11α‑dihydroxylup‑20(29)‑en‑28‑oic acid、3α，11α，23‑trihydroxy‑23‑oxo‑lup‑20(29)‑en‑28‑oic acid、3α，11α‑dihydroxy‑23‑oxo‑lup‑20(29)‑en‑28‑oic acid、impressic acid、acankoreanogenin。本发明的三萜化合物分离制备方法具有提取率高，操作简单，溶剂用量少，无样品吸附、损失和污染，单体纯度高等优点。

主权项

1.一种利用高速逆流色谱法从细柱五加叶中分离制备三萜化合物的方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：(1)细柱五加叶三萜粗提物的制备：取细柱五加叶，用5‑12倍体积的溶剂提取，静置，过滤，然后减压蒸馏回收溶剂得到细柱五加叶提取物浸膏；细柱五加叶提取物浸膏用水分散，经低极性溶剂萃取除去色素后用脂肪酸酯萃取得到三萜粗提物；(2)高速逆流色谱法分离制备三萜化合物高速逆流色谱法分离制备三萜化合物的两相溶剂系统由正己烷、脂肪酸酯、脂肪醇和水组成，四种组分体积比为1‑2∶1.5‑2.5∶0.8‑2.5∶0.5‑2，将该溶剂系统混合均匀静置后，分开上下相，超声20‑40min，溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，以5‑40ml/min的流速将上相泵入管路，待固定相充满整个管路后，停泵，启动主机，然后以0.6‑3ml/min的流速泵入流动相，当上下相平衡时，记录固定相流出的体积，计算得到固定相的保留值，取步骤(1)制备的三萜粗提物，溶解于固定相中，进样，根据检测器检测谱图，收集各峰的组分，将各峰对应的收集液分别浓缩，干燥。