[发明专利]一种改进的开放染色质检测方法及其试剂盒和应用

摘要

本发明公开了一种改进的开放染色质检测方法，将细胞组织研磨成粉末后加入PBS重悬，离心并去除上清，再向沉淀中加入裂解液，充分裂解后离心并去除上清，沉淀用PBS重悬，将重悬后的样品过40μm滤膜得到含细胞核的滤液；然后对滤液中的细胞核进行计数，挑取50，000细胞核于PBS中，离心并去除上清，向沉淀中加入转座体系，进行转座反应；然后对已转座的DNA进行纯化，再进行PCR扩增，最后将PCR产物纯化后测序。所述方法能有效对临床冰冻组织进行染色质结构检测，其结果与新鲜组织检检测的结果完全一致，该方法可结合患者的临床数据，从而建立基于染色质结构检测与患者预后的模型，对于促进精准医疗的发展，具有重要的意义。

主权项

1.一种细胞核提取方法，其特征在于，将细胞组织研磨成粉末后加入PBS重悬，离心并去除上清，再向沉淀中加入裂解液，充分裂解后离心并去除上清，沉淀用PBS重悬，将重悬后的样品过40μm滤膜得到含细胞核的滤液；所述裂解液包含以下终浓度的各组分：50mM HEPES（pH 7.5），140 mMNaCl，1 mM EDTA（pH 8.0），0.5% NP‑40，0.25% TritonX‑100。