[发明专利]一种郁闭林中火力楠外植体的消毒方法

摘要

本发明涉及一种郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，包括如下步骤：S1选取外植体采集的时间；S2选择外植体的采集长度；S3外植体的初步清洗；S4外植体消毒的合适长度选取；S5外植体的消毒；S6顶芽包片的剥离；S7接种外植体的剪取。本发明适用于郁闭林中火力楠的外植体消毒，对火力楠无性系选育研究和优良无性系的组培快繁及规模化生产具有重大的现实意义。

主权项

1.一种郁闭林中火力楠外植体的消毒方法，其特征在于，包括如下步骤：S1选取外植体采集时间：在夏、秋两季顶芽抽包，苞芽长到3～5cm，苞片未打开前采集枝条做外植体；S2选择外植体的采集长度：选择外植体含抽苞顶芽的茎段10～15cm；S3外植体的初步清洗：置于洗盘中，打开流动的自来水，一边用手轻抹外植体上的绒毛，一边清洗，直到看不见绒毛为度，然后干毛巾吸去外植体上的水分，备修剪消毒用；S4外植体消毒的合适长度选取：取步骤S3清洗出来的外植体，筛选修剪外植体，具体包括如下步骤：A1.去除有病虫伤害或运输受伤的外植体；A2.苞芽长度超过4cm，从顶向下剪除过高部分，保留苞芽顶部4cm以下，苞芽基部2～3cm；A3.除去外植体枝条的基部老化部分，仅保留新抽的茎段；A4.外植体上下修剪后长度为6～7cm的带顶芽莖段待消毒；S5外植体的消毒，其方法具体包括如下步骤：B1.步骤S4修剪好的外植体，放入200ml的果酱瓶中，外植体基部朝下，顶芽朝上；B2.将0.1％的升汞倒入果酱瓶，浸没过外植体，再将果酱瓶移进超声波清洗机，超声波清洗机水槽中的自来水线，浸没过果酱瓶内的升汞线，开动超声波清洗机，记时开始；B3.在SONICS状态下3～8min，在DEGAS状态下3～8min清洗消毒外植体；S6顶芽包片的剥离：在超净工作台上，用无菌刀片，从顶芽包片基部向上慢慢削剥苞片，直到可以完全打开苞片，去除苞片，并去除已经长大的叶片，轻刮苞片下面的茎毛；S7接种外植体的剪取：在超净工作台上，将经过S6处理的外植体，以苞芽基部为中心，苞芽长1.5～2.0cm，基部长0.8～1.5cm，总长为2.5～3.0cm为标准，剪取接种外植体。