[发明专利]一种可诱导鱼类雌核发育的失活精子液的制备方法

摘要

本发明是属于鱼类人工生殖发育技术领域，具体涉及一种可诱导鱼类雌核发育的失活精子液的制备方法。本发明首先将雄性亲鱼用高锰酸钾水溶液进行鱼体消毒，之后采用二次注射法进行催产排精；采集雄性亲鱼精液配成精子处理液；通过育种机进行精子AＲTP失活处理，之后在精子处理液中加入5μL 0.6M甘露醇、10μL Hank's液,即得到失活精子液，供于雌核发育的卵子进行受精使用。采用常压室温等离子体作为鱼类精子的灭活剂制备可诱导鱼类雌核发育的失活精子液，可有效地对同源或异源雌性亲鱼的卵,诱导雌核发育进行“受精”，其受精率达到40‑67%，孵化率20‑45%。

主权项

一种可诱导鱼类雌核发育的失活精子液的制备方法,其特征在于：1）催产排精选择体质健壮、无病无伤、达性成熟年龄的雄性亲鱼，首先将雄性亲鱼用高锰酸钾水溶液进行鱼体消毒，之后采用二次注射法进行催产排精；2）精子处理液制备：采集雄性亲鱼精液，按精液：精子稀释液为1：5的体积比配成精子处理液，备用；3）精子失活处理对精子处理液进行精子AＲTP失活处理，之后在精子处理液中加入5μL 0.6M 甘露醇、10μL Hank's 液,即得到失活精子液；4）失活精子液的保存取30μL失活精子液，加入25μL的0.2M 三磷酸腺苷（ATP）、5μL 30%甘油溶液，混合后储存于冰块中，供于雌核发育的卵子进行受精备用；所述的雄性亲鱼是指雄性鲫鱼或雄性鲤鱼。